. aktwynoid ******
PttygorowIM iv siaiyw.c M<M ***** ''/y'. ’ k,mlr(>in« i W* “* ^nowego pH 5,6
„ 5 «o rriM buforu
Ł,c“ ^aariantu (rozcieńczonego
wariant; korzenie kontrolni:, korzenie traktowane. ^
Wykonanie:Do dwu osobnych probówek dod.n ki I I Z jednego
0,5 cm3 20 mM guajakolu + 0.5 cm1 ekstraktu en/yro.u /c/ przy
n..x ra_ a , ,v , .„} « -na ^umm UłOł zmicray^ a*'-
długości fali 470 rtm
50x).Po dodaniu 0.5 cm’ 60 mM roztworu H2Oj zmierzyć natychmiast oznaczyć
a nastepmie za pomocą stopera mierzyć czas 4 minut I <> UP y absorbancję przy długości fali 470 nm Wynik zanotować w mbc (j(./ynnikow^ doda04P kolejno
Do każdego oznaczenia próby badanej (korzeń i/liści) wykonać [ '' guajakolu * 0,5 Cffi
do jednej probówki: I cm1 50 mM buforu octanowego pil 5,6 4,5 «> nrzv długości fali
ekstraktu enzymatycznego (rozcieńczonego 50x). Brak HjOj. Oznaczyć ab,.
470 nm nie inkubując próby. ^ oznaczenia (bufor
Odczyty absorbancji wykonać kalibrując Spektrofotometr względem buforu
octanowy pH 5,6).
Uzupełnić tabelę.
Wartości absorbancji (A) odczytać po 4 minutach inkubacji. Uzyskane wartości absorbancji z d P uśrednić. Końcowe wartości w tabeli przeliczyć na gram świeżej masy. Obliczenia wykonać uwzględniając: rozcieńczenie ekstraktu enzymatycznego oraz rozcieńczenie wynikające z homogenizacji (przykład pod tabelą).
Tabela aktywności peroksydazy.
Rodzaj próby |
Ilość prób badanych |
) Wartości A |
Średnia wartość A |
Wartość A/gram świeżej masy | |
Kontrolna z liści |
2 i | ||||
1 Traktowana | z liści |
2 | ||||
Kontrolna z korzeni |
2 | ||||
1 Traktowana z korzeni j |
2 |
r~ 1 |
4