DSC00210 (8)

^ *^Jrł*^e ^^enu> ^a znajdujący się w roztworze, 2,6-DClP ^{nVft n,eb,esk}a) do zredukowanej (bezbarwnej).

ulega

C!

2 HO

tdichlorofcnoloindofcnol

forma

zredukowana)

Cl

2,6-dichlorofenoloindofcnol (forma utleniona)

Materiał: liście szpinaku iub fasoli (rośliny 2 tygodniowe)

redukcji z formy ud

OH _{+ 0?}

-dzierż, 1 zlewka — poj 100 cm\ l cylinder — poj. 25 cm , fizelina, gaza, miracloth,

** i i^iek. I skalpel, waga, 5 probówek* ----- ~ <;

.........- puj    v... , • -j-    j lejek

łaźnia wodna 25°C, papier milimetrowy, linijka, °°^w    ’ __ p₀j

1 statyw na probówki, palnik, łapa drewniana, \ P^łP^e 1 bagietka, folia aluminiowa, spekol, kuwety 1 ^cm    • _{r m}kubacyjny

Odczynniki 0,5 M sacharoza, 10% propylenoghkol, roz• i 0,4 M KH_:PG₄ (pH 6,5), 0,05% 2,6-dichlorofenoiomdote

cm, l pipeta o poj. 5 cm\ zawierający 0,08 M KCl

Wykonanie:

Otrzymanie zawiesiny chloroplastów;

la) Przygotowanie zawiesiny chloroplastów (metoda uprasuj )*    ...

. ,wtvlmvana W celu zwiększenia

Liście szpinaku lub fasoli umyć pod bieżącą wodą, a następnie a >    -    ....

Odwazvć 3 u liści, pociąć drobno

turgoru można ie umieścić na pewien czas w worku tonowym w y

;    .    ■    ą minut z 13 cm schłodzonego

zez podwójną warstwę f.zeliny Przesącz

i umieścić w schłodzonym moździerzu. Homogenizować przez

0,5 M roztworu sacharozy Homogenat przesączyć przez zawiera chloroplasty.

!b) Izolacja chloroplastów »•« Machlis i    Torrey.

30 g umytych liści szpinaku lub tusoi: macerowac w homogenizerze przez 5 minut z >0 cm¹ 0.5 M roztworu sacharozy Homogenat przesączyć przez podwójną warstwę gazy i wirować przez 10 minut przy 50 x g Usunąć osad, a supernatant wirować przez 10 minut przy 600 x g. Supematant usunąć, a do osadu zawierającego chloroplasty dodać schłodzony 10% roztwór >rop>ienoglikoiu t przez zamieszanie bagietką uzyskać zawiesinę chloroplastów.

Reakcja Hilla.

Lmiescw w prełvwce 3 er¹ zawiesiny chloroplastów otrzymanej jedną z 2 opisany; .czerniej, metod i poddać iernictae.' denaturacii delikatnie ogrzewając nad palnikiem az -rżenia Następnie ochłodzie probówkę pod bieżącą wodą i w razie potrzeby zawiesinę przesąc; rzez miradoth Przy 20; •••«.• ać 4 probówki jedną dla próby kontrolnej i trzy dla badanych, z któr

28