niezbędne jest oddzielenie a-tokoferolu od substancji towarzyszących, urw żliwiających bezpośrednie oznaczenie witaminy E, np. metodą Emmerie° Engel, która z racji wrażliwości na różne substancje redukujące jest specyficzna. 0
Rozdzielanie tokoferoli i tokotrienoli może być prowadzone za pom0. chromatografii kolumnowej, a także chromatografii bibułowej i cienkowarst wowej. Bardzo dobre wyniki daje chromatografia gazowa i cieczowa, która zapewnia uzyskanie wyraźnego rozdziału wszystkich związków o aktywność' witaminy E. Niewątpliwie najlepsze rezultaty można osiągnąć przy zastosowa. niu HPLC (high pressure liquid chromatography, tj. wysokociśnieniowej chro. matografii cieczowej). Związki rozdzielone tą metodą mogą być następy identyfikowane i ich stężenie mierzone kolorymetrycznie, spektrofotometry^, nie (UV) lub spektrofluorymetrycznie.
Estry tokoferoli muszą być przed oznaczaniem poddane hydrolizie. W ce|u uniknięcia strat tokoferoli proces hydrolizy należy prowadzić w środowisku pozbawionym tlenu i w obecności przeciwutleniaczy. Proces hydrolizy w wa-runkach sprzyjających rozkładowi wolnych form tokoferoli umożliwia selek-tywne oznaczenie zestryfikowanych i wolnych tokoferoli.
Tokoferole są szeroko rozpowszechnione w przyrodzie, w tym również w produktach spożywczych, w których występują głównie w postaci wolnej, tzn. niezestryfikowanej. Najbogatszymi źródłami tokoferoli są oleje z nasion zbóż. Wśród olejów roślinnych wysoką zawartością tokoferoli wyróżniają się olej słonecznikowy, sojowy, kukurydziany oraz olej z zarodków pszenicy i z nasion bawełny. Dodatkowym ważnym elementem jest udział a-tokoferolu w ogólnej puli tokoferoli.
Tłuszcze pochodzenia zwierzęcego i niektóre oleje roślinne (kokosowy i z oliwek) są raczej ubogimi źródłami tokoferoli, albowiem zawierają je w nieznacznych ilościach rzędu kilku mg w 100 g. Warto zaznaczyć, że w tłuszczach pochodzenia zwierzęcego na a-tokoferol przypada ponad 90% z ogólnej ilości występujących w nich związków o aktywności witaminy E. Rafinacja surowych olejów roślinnych, mająca na celu uzyskanie oczyszczonego i uszlachetnionego produktu finalnego, prowadzi do znacznych strat tokoferoli. Straty te mogą dochodzić nawet do 40%. Skutkiem tego jest nie tylko zmniejszenie aktywności witaminowej, lecz również obniżenie trwałości samego oleju, albowiem tokoferole, jak wiadomo, są naturalnymi przeciw-utlemaczami. Ponadto w toku innych procesów technologicznych stosowanych
3.2
^wartość witaminy
E w wybranych produktach spożywczych [4, 9, 12, 13, 18]
Rodzaj produktu |
Zawartość witaminy E [mg w |
100g] | ||||
ogółem |
a-tokoferol |
/ł-tokoferol |
y-tokoferol |
<5-tokofero |
suma toko- trienoli | |
^ Warzywa | ||||||
Groch |
7,3 |
0,3 |
— |
6,4 |
0,6 |
- |
marchew |
0,66 |
0,6 |
0,02 |
| |
- |
0,04 |
sałata |
1,93 |
1,8 |
- |
0,13 |
- |
- |
szparagi |
1,97 |
1,4 |
0,5 |
0,07 |
- |
- |
g. Oleje roślinne | ||||||
bawełniany |
75 |
47 |
- |
28 |
- |
- |
kukurydziany |
164 |
30 |
- |
95 |
- |
39 |
palmowy |
74 |
20 |
- |
- |
1 |
54 |
sezamowy |
67 |
26 |
- |
41 |
- |
1 |
rzepakowy |
67 |
24 |
- |
42 |
1 |
- |
z zarodków pszenicy |
318 |
250 |
46 |
20 |
2 |
i |
C. Nabiał | ||||||
jaja |
10 |
10 |
- |
- |
- |
1 |
margaryna |
71 |
15 |
- |
54 |
2 |
- |
masło |
0,3 |
0,3 |
- |
- |
- |
| |
D. Inne | ||||||
majonez |
13 |
13 |
- |
- |
i |
1 |
smalec |
2,6 |
li |
- |
0,7 |
- |
°’7 |
w przetwarzaniu żywności, w tym również zawartych w nich tłuszczów, a także w czasie przechowywania produktów spożywczych, zachodzą w niej dalsze straty związków o charakterze witaminy E.
Masło zawiera praktycznie wyłącznie a-tokoferol (ponad 90% ogólnej puli tokoferoli) podobnie jak mleko, jednakże stężenie witaminy E jest w tych produktach bardzo małe, np. w mleku waha się ono od 20 do 110 /zg w 100 g i w dużej mierze zależy od pory roku. W jajach zawartość a-tokoferolu waha się w granicach 0,8 -1,2 mg w 100 g.
Tokoferole są związkami termostabilnymi i ogrzewanie ich nawet do 200°C nie powoduje znaczących strat aktywności, o ile w środowisku nie są obecne nadtlenki lub tlen. W słabokwaśnych roztworach wykazują dużą trwałość. Obecność metali ciężkich, a w szczególności żelaza, przyspiesza utratę aktywności biologicznej tokoferoli. Bardzo niekorzystnie na trwałości witaminy E odbija się obecność zjełczałych tłuszczów, co związane jest z przyspieszeniem procesów oksydacyjnych uwarunkowanych działaniem tlenu powietrza.
Suszone warzywa zawierają zaledwie 30-50% pierwotnej ilości witaminy E występującej w surowcu; podobnie jest w przypadku siana. W zielonych kiszonkach zachowalność tej witaminy jest znacznie lepsza i wynosi ok. 75%.