fizjologia stosowana4

Cezary Walała

Ćwiczenie to pozwoli zaobserwować:

■    jak warunki krążenia pozaustrojowego wpływają na aktywację płytek krwi;

■    jak warunki te wpływają na szybkość niszczenia płytek oraz na spontaniczną agregacje płytek;

■    jaki jest sens stosowania aprotyniny podczas zabiegów z zastosowaniem krążenia pozaustroj owego.

Wykonanie ćwiczenia

1.    Załaduj program WinMDI.exe do opracowywania danych z cytometru przepływowego FACScan.

2.    Wczytaj hep0.62, hep0.42 (ekspresja antygenów CD62 lub CD42b w płytkach we krwi pełnej utrwalonej natychmiast po wynaczynieniu) jako wykresy punktowe (.Dotplot) oraz wyświetl populację mierzonych obiektów (komórek) w układach FSC vs. FL1 oraz FSC vs. FL2. Ustal wartości progowe świecenia niespecyficznego dla fikoerytryny (kanał FL2).

krwi

krwi

krwi krążenie

we krwi krążenie

3.    Wczytaj zbiory:

hep60.62 (ekspresja antygenu CD62 w płytkach inkubowanej w temp. pokojowej w obecności heparyny), hep60.42 (ekspresja antygenu CD42b w płytkach inkubowanej w temp. pokojowej w obecności heparyny), pompa.62 (ekspresja antygenu CD62 w płytkach I poddanej przepływowi w warunkach symulujących pozaustrojowe w obecności heparyny, bez aprotyniny), I pompa.42 (ekspresja antygenu CD42b w płytkach I poddanej przepływowi w warunkach symulujących ]_ pozaustrojowe w obecności heparyny, bez aprotyniny), trask.62 (ekspresja antygenu CD62 w płytkach we krwi poddanej przepływowi w warunkach symulujących krążenie pozaustrojowe w obecności heparyny oraz aprotyniny), trask.42 (ekspresja antygenu CD42b w płytkach we krwi poddanej przepływowi w warunkach symulujących krążenie pozaustrojowe w obecności heparyny oraz aprotyniny) jako histogramy. Ustal znaczniki (markery) świecenia niespecyficznego dla fikoerytryny (kanał FL2) oraz wyświetl wartości fluorescencji w kanałach FL1 oraz FL2.

4.    Wczytaj zbiory hep0.62, hep0.42 jako wykresy punktowe (Dotplot) oraz ustal regiony na skali log dla:

a)    mikropłytek (zakres 1>40);

b)    normopłytek (zakres 40-400);

c)    agregatów płytki-płytki i płytki-erytrocyty (zakres 400-2000);

d)    agregatów płytki-krwinki białe (powyżej 2000).