2011-04-28
Reakcja immunologiczna
(serologiczna) polega na swoistym
łączeniu się antygenów z
Testy immunologiczne.
przeciwciałami.
W diagnostyce tzw. niehodowlanej
wykorzystuje się to w dwojaki sposób:
Rozpoznawanie nieznanych antygenów
przy użyciu znanych przeciwciał
Anna Kaleta
Rozpoznawanie nieznanych przeciwciał
Górnośląska Wyższa Szkoła Handlowa w Katowicach
Immunologia przy użyciu znanych antygenów
2010/2011
AGLUTYNACJA (odczyn zlepny) polega
Wyróżnia się następujące rodzaje
na zlepianiu upostaciowanych antygenów
aglutynacji:
(aglutynogenów) z przeciwciałem (aglutyniny).
Bezpośrednią (czynną)- przeciwciała reagują
bezpośrednio z naturalnymi nośnikami
Powstały kompleks antygen- przeciwciało w
antygenu jakimi sÄ… krwinki, bakterie:
obecności elektrolitu wypada z zawiesiny w
postaci agregatów (aglutynaty).
Pośrednią (bierną)- rozpuszczony antygen
opłaszcza się najpierw na nośniku, jakim są
krwinki czerwone (hemaglutynacja) czy
czÄ…steczki lateksu i dopiero potem poddaje
się reakcji ze swoistym przeciwciałem:
1
2011-04-28
Precypitacja jest reakcjÄ… immunologicznÄ…, w
Pośrednią (bierną)- rozpuszczony antygen
której rozpuszczalne antygeny
opłaszcza się najpierw na nośniku, jakim są
wielodeterminantowe, Å‚Ä…czÄ…c siÄ™ z
krwinki czerwone (hemaglutynacja) czy
przeciwciałami, tworzą duże hydrofobowe
czÄ…steczki lateksu i dopiero potem poddaje
kompleksy wypadajÄ…ce z roztworu jako
się reakcji ze swoistym przeciwciałem:
precypitaty (zmętnienie, strąt).
Precypityny to
przeciwciała biorące
udział w reakcji
Precypitogeny to
antygeny wykorzystane
w reakcji
Najsilniejsza precypitacja zachodzi
Reakcja precypitacji przebiega
podczas stanu równowagi-
w dwóch etapach:
ekwiwalencji.
1. Reakcja antygen-przeciwciało
skutkujÄ…ce powstaniem kompleksu
2. Wytrącenie powstałego kompleksu w
postaci precypitatu pod wpływem
elektrolitów obecnych w środowisku
reakcji (najczęściej NaCl) przy
optymalnych warunkach ilości antygenu
do przeciwciał.
2
2011-04-28
Precypitację można
Klasyfikacja metod immunodyfuzji:
przeprowadzić w różnych
Pojedyncza- jeden
środowiskach:
reagent (najczęściej
antygen) dyfunduje,
Płynnym- precypitacja pierścieniowa;
natomiast drugi
odczyn kłaczkujący tzw. test flokulujący
(przeciwciało) znajduje
się w żelu, a jego
Stałym (immunodyfuzja)  pojedyncza i
koncentracja jest stała
podwójna immunodyfuzja płytkowa;
we wszystkich punktach
środowiskiem reakcji jest najczęściej
Podwójna- polega na
żel agarozowy
wzajemnej penetracji
antygenu i przeciwciała w Podwójna immunodyfuzja płytkowa
żelu agarowym
Gronkowiec złocisty
Staphylococcus auresus
Gronkowce mogą powodować chorobę wskutek
Test gronkowcowy- służy do
zarówno zdolności do namnażania się i
rozprzestrzeniania siÄ™ w tkankach, jak i wytwarzania
identyfikacji bakterii z
licznych substancji zewnątrzkomórkowych.
Niektóre z tych substancji są enzymami, inne można
rodzaju Staphylococcus z
uznać za toksyny.
Szczepy tego gatunku charakteryzowane sÄ… jako
wykorzystaniem aglutynacji.
zjadliwe (wirulentne) na podstawie zdolności do
wytwarzania KOAGULAZ, nukleaz (DNAza) Ä…- ²- Å‚-
hemolizyn, hialuronidaz, lipaz, fibrynolizyny oraz
egzo- i enterotoksyn.
3
2011-04-28
Choroby wywołane przez
Charakterystyka toksyn S. aureus
Staphylococcus aureus
Egzotoksyny- Ä… hemolizyna powoduje lizÄ™ krwinek
Zakażenia skórne (zapalenie
czerwonych i uszkadza krwinki płytkowe
mieszków włosowych, czyraki,
Enterotoksyny- (6 rozpuszczalnych toksyn), ciepłostałe
(gotowanie przez 30 min) i odporne na działanie
jęczmienie)
enzymów przewodu pokarmowego, powoduje zatrucia
Zakażenia głębokie (zakażenie
pokarmowe
szpiku i kości, zapalenie płuc)
Koagulaza- ochrona komórki przed fagocytozą poprzez
opłaszczanie neutrofilów fibryną, ścina osocze krwi
Choroby wywołane działaniem
ludzkiej
toksyn gronkowcowych:
Hialuronidazy- hydrolizują międzykomórkowy cement
 Zatrucia pokarmowe tkanek, jaki stanowi kwas hialuronowy, dzięki nim
bakterie mogą się rozprzestrzeniać w głąb organizmu
 Zapalenie złuszczające skóry
 Zespół wstrząsu toksycznego
Clumping factor- czynnik CF Wykonanie ćwiczenia
Odczynnik Test reagent- zawiera zawiesinÄ™
CF to tzw. koagulaza związana; ścina
krwinek baranich opłaszczonych fibrynogenem
fibrynogen i uczestniczy w osłonie
z dodatkiem azydku sodu.
gronkowców prze leukocytami oraz Odczynnik Control reagent- zawiera zawiesinę
krwinek baranich z dodatkiem azydku sodu
innymi przeciwbakteryjnymi czynnikami.
Do kropli każdego z odczynników dodać ezą
Clumping factor jest czynnikiem
masę bakteryjną i mieszać ok. 30 sekund.
występującym w ścianie komórkowej Odczyt i interpretacja wyników
 Dodatni- aglutynacja z odczynnikiem A i brak
bakterii i powodujÄ…cym aglutynacjÄ™
aglutynacji z odczynnikiem K
krwinek opłaszczonych fibrynogenem.
 Ujemny- brak aglutynacji w obu odczynnikach
4