101648

cytoplazmy gdzie ulegają dalszemu powielaniu wg mechanizmu obracającego się kola. Ostatecznie proces prowadzi do utworzenia potomnych kolistych jednoniciowych genomów fagowych. Tzn białko A przecina nić „+”, co powoduje odsłonięcie wolnego końca 3’ OH, do którego dołącza się komórkowa polimeraza III DNA i krążąc po nienaruszonej kolistej nici która pełni rolę matrycy polimeraza syntetyzuje komplementarną nić „+" fagowego DNA. Powiększająca się nowa nić „+” powoduje ciągłe wypyclianie tego kompleksu. Po zakończeniu jednego pełnego obrotu przez polimerze jest syntetyzowany jeden pełny monomeryczny genom wirusowy i te pojedyncze genomy wirusowe ulegają odcięciu i kolistemu zamknięciu- cyrkularyzacji. Powstaje infekcyjny koliście zamknięty fagowy DNA w postaci nici „+” DNA. Infekcyjny DNA fagowy jest upakowywany w białkowy kapsyd i po lizie komórki gospodarza gotowe cząstki fagowe wydobywają się do środowiska i mogą atakować kolejne wrażliwe komórki gospodarza.

Replikacja fagów zawierających dwuniciowy DNA np. A (lambda)- popularny fag pasożytujący na komórkach E.coli. Jest to fag dwuniciowy, łagodny (umiarkowany), może uczestniczyć w transdukcji ograniczonej.

Proces nie do końca poznany.

Przebieg:

1.    W kapsydzie (osłonce komórkowej) DNA fagowy ma postać dwuniciowej linowej cząsteczki, która jest zakończona tzw lepkimi końcami (wzajemnie do siebie komple menta mymi).

2.    Po wprowadzeniu fagowego DNA do wrażliwej komórki bakteryjnej lepkie końce liniowej dwuniciowej cząsteczki fagowego DNA tworzące sekwencję cos ulegają połączeniu.

3.    Przerwy są sklejane (łączone) przez komórkową ligazę DNA, co prowadzi do wytworzenia kolistej dwuniciowej cząsteczki DNA (cyrkularyzacja). Na tym etapie następuje tzw faza... Fag A należy do fagów łagodnych.

I    możliwość: Po zakażeniu komórki gospodarza zostanie uruchomiony cykl lityczny.

Cykl lityczny rozpoczyna się od syntezy białek fagowych, które zapoczątkowują replikację fagowego DNA. Za proces inicjacji replikacji fagowego DNA odpowiedzialne są produkty białkowe genów fagowych O i C między którymi leży fagowa sekwencja ori. Początkowo, przez 2-3 rundy replikacyjne DNA fagowy jest replikowany wg mechanizmu teta. Wczesne białka fagowe przestają być produkowane a ich miejsce zajmują tzw późne białka fagowe. Późne białka fagowe są odpowiedzialne za przełączenie mechanizmu replikacji faga na mechanizm obracającego się koła. W efekcie tej replikacji powstają konkatamery- długie dwuniciowe cząsteczki DNA, które zawierają z reguły 8-10 powtórzeń pełnego genomu faga. W populacji pewien odsetek stanowić tez mogą dimery- cząsteczki zawierające 2 powtórzenia (zduplikowany genom fagowy). Konkatameiy są rozcinane w pozycji cos przez białko A (endonukleaza, produkt genu A) i pakowane do kapsydów (główek fagowych). Po skompletowaniu całej już cząstki fagowej, dojrzale fagi na skutek uprzedniej lizy komórki wydostają się z cytoplazmy do środowiska i mogą atakować kolejne komórki gospodarza.

II    możliwość: Po zakażeniu komórki gospodarza i cyrkularyzacji uruchomiony zostaje cykl li#ogenny.

Na tym etapie wczesne białka fagowe nie są uruchamiane (produkowane), natomiast wytwarzany jest fagowy enzym integraza, któiy uczestniczy we wbudowywaniu się (integracji) fagowego DNA do chromosomu E.coli. Fag po wbudowaniu się do cliromosomu gospodarza staje się profagiem, a komórkę taką nazywamy lizogenną. Wbudowanie się nie jest przypadkowe, uczestniczą w nim odpowiednie sekwencje genomu fagowego i cliromosomu E.coli. Fag A ulega integracji do chromosomu gospodarza w określonym ściśle