112926

Wektor:

Wektor, do którego wklonowana będzie sekwencja kodująca białko będące przedmiotem zainteresowania powinien przede wszystkim:

•    Zawierać miejsce wielokrotnego klonowania (ang. multicloning site. MCS) ze znaczną liczbą miejsc restrykcyjnych ułatwiających insercję egzogennego DNA;

•    Region promotorowy poprzedzający MCS. Promotor powinien funkcjonować wydajnie w komórkach, w których będzie produkowane rekombinacyjne białko.

•    Szereg iiuiych elementów zapewniających prawidłowy przebieg transkrypcji i translacji transgenu:

•    Elementy ułatwiające oczyszczanie produkowanego białka;

• Elementy ułatwiające prowadzenie prac analitycznych

• Elementy kodujące markery selekcyjne

Organizmy, w którym produkowane mogą być rekombinowane białka:

Podstawowym gospodarzem, któiy wykorzystywany jest do produkowania białek rekombinowanych w właściwościacli terapeutycznych są bakterie, przede wszystkich Escherichia coli.

Istnieją dziesiątki szczepów' K.coli zmodyfikowanych genetyczrue tak. aby można było wybrać najbardziej przydatny do realizacji założonego celu.

W bakteriach mogą być otrzymywane jedynie takie białka, których aktywność biologiczna nie zależy w znaczącym stopniu od potranslacyjnych modyfikacji, które mogą jedynie zajść w komórkach eukariotycznych.

Inne organizmy:

Drożdże: Saccaromyces cerevisiae i Pichia pastoris

Komórki insektów: system bakulowirusowy

Komórki ssacze: np. Unia CHO (chinese hajster ovary cells).

Uproszczony schemat poszukiwania wlaśdwej linii komórkowej do produkcji biofannaceutyku.

♦O*

*

*•»<*/* *•

2