55284

samo miejsce wiązania nie zmienia Km natomiast obniża Vmax

na wykresie 1/V od l/[s] - krzywa się płaszczy ale przyczepiona w punkcjie przecięcia z l/[s] inhibitor obniża siteznie funkcjonalenego enzymu reszta enzmu zachowuje się jak bardziej rozcięczon roztwór

Vmax app = Vmax/1+([I] /Ki)

inliibicja akompetycyjna (ang ankopetitiw)

wiąże się do kompleksu enzym subtrat a nie do wolnego enzymu

na wykresie l/v od 1/Vs proste równoległe obniża się się Vmax i Kmapp zwiększa się powinowactwo enzymu do subtstrtu

więcej substratu wiąże się do enzymu ale zostają w kompleksie ESI

inhibicja mieszana

syntaza tymidalinowa dostarcza tymidylanu

jego potencjalne inhibitory: zmieniony substrat lub zmieniony...hydrofolian proste nie przecinają się na l/v od l/[s] na osi x ani na y

inhibitory częściowe

aktywność enzymu nie można sprowadzić do zera nawet stosjąc makymalne stężenia inhibitora IC50

stężenie inhb wymagaane do siągniecia połowy całkowitej inhibicji

z sigmoidalnego wykresu można odczytać stężenie substancji potrzebne do wywołania 50% maksymalnej zmiany monitorowaneog sygnału

wykres vi /V od [I]

do badania wiązania inhibitora z receptorami siedzenia procesów komórkowych

stężenia w szerokim zakresie (7 rzędwo wielkości 10-3 10-2 ... 10⁴

IC 50 dla określonego inhibitora może zmieniać się zależnie od stężenia substratu

pomiar należy prowadzić w takim samym stężeniu substratu

IC50 do obliczania Ki

dla kompetycyjnych Ki= IC50/ (1/[S] / Km)

dla niekompetycyjnych Ki=IC50 przy założeniu żę alfa = 1 (nieważna co to alfa) dla akompetycyjnych Ki=IC50 /(I + Km/[S]) gdy [S] » Km wtedy Ki~IC50

ułatwia gdy mierzy się względną siłę hamowania zw podobnch strukturalnie do jednej cząsteczki macierzystej