75587

TESTY WYKRYWAJĄCE AMINOKWASY:

•    TYROZYNĘ - PRÓBA MILLONA Wykonanie:

Do 1 cm3 roztworu tyrozyny dodać 1-2 krople odczynnika Miliona i ogrzewać przez 1 minutę we wrzącej łaźni wodnej. Wytrącenie się czerwonego osadu lub czerwona barwa roztworu świadczy o obecności tyrozyny.

Interpretacja:

Reakcja ta jest charakterystyczna dla pierścienia fenolowego. Z aminokwasów jedynie

tyrozyna wolna lub związana w białkach daje z odczynnikiem Miliona [Hg(N03)2 w stężonym HN03] czerwony osad.

•    TRYPTOFAN - PRÓBA ADAMKIEWICZA - HOPKINSA Wykonanie:

Do 1 cm3 roztworu tryptofanu dodać 1 cm3 stężonego CH3COOH i lekko wymieszać.

Mieszaninę podwarstwić 2 cm3 stężonego H2S04. Obserwować reakcję barwną na granicy dwóch cieczy.

Interpretacja:

Dodatni wynik reakcji charakteryzuje się powstaniem fiołkowego pierścienia na granicy cieczy. Tworzące się fiołkowe zabarwienie jest wynikiem reakcji tryptofanu (pierścień indolowy) z kwasem glioksalowym. Kwas glioksalowy występuje jako zanieczyszczenie stężonego kwasu octowego.

•    FENYLOALANINĘ - PRÓBA KSANTOPROTEINOWA

Celem zadania jest wykazanie obecności aminokwasów aromatycznych w badanym roztworze na podstawie reakcji barwnej, której produktami są nitrowe pochodne pierścieni benzenowych zawartych w aminokwasach aromatycznych. Wykonanie. Do 1 cm3 1% roztworu białka dodać ok. 1 cm3 stęż. HN03 i ogrzewać mieszaninę przez 30 sekund. Osad strącającego się białka barwi się na żółto.

•    CYSTEINĘ

Celem zadania jest wykazanie obecności cysteiny w badanym roztworze na podstawie powstającego siarkowodoru i siarczku ołowiu.

Wykonanie. Do 1 cm3 1% roztworu białka dodać 1 cm3 20% NaOH i parę kropli 2 mol/dm3 octanu ołowiu (II), podgrzać. Płyn ciemnieje. Mieszaninę oziębić i dodać do niej ostrożnie kroplami stężony HCI. Wydziela się siarkowodór.

Z metioniny w warunkach reakcji nie powstaje siarkowodór i wynik próby jest ujem ny.

•    CYSTEINĘ LUB CYSTYNĘ

Do 1 cm3 roztworu cysteiny lub cystyny w probówce dodać 2 cm3 roztworu NaOH i ogrzewać do wrzenia przez kilka minut. Następnie wprowadzić kilka kropel roztworu Pb(CH3COO)2 i ponownie ogrzać. Z roztworu wydziela się brunatno-czarny osad siarczku ołowiu (II) PbS.