Co to jest „biotechnologia"?
> Jest to interdyscyplinarna dziedzina nauki, integrująca nauki przyrodnicze i inżynieryjne w celu osiągnięcia zastosowań organizmów, komórek lub ich części oraz molekularnych analogów do pozyskiwania produktów lub usług
> Podstawowe terminy biotechnologiczne:
■S Ex vivo: wyodrębnienie określonych komórek z organizmu, ich modyfikacja genetyczna In vitro i powtórne wprowadzenie do organizmu S In vivo: wprowadzenie genu (np. z wektorem) do organizmu S In vitro: modyfikacja genetyczna poza organizmem (w laboratorium)
S Transformacja: proces przeniesienia DNA wyizolowanego z hodowli bakteryjnej do bakterii biorcy
S Transfekcja: proces przeniesienia DNA wyizolowanego z bakteriofaga do bakterii biorcy lub proces przeniesienia DNA do komórek eukariotycznych S Transgenizacja: proces transformowania całych organizmów, w wyniku którego organizm ulega modyfikacji genetycznej ■S Transgen: gen przeniesiony do organizmu, w wyniku czego powstaje organizm transgeniczny
S Sonda genetyczna: jednoniciowy kwas nukleinowy (DNA/RNA) znakowany radioaktywnie, używany do identyfikacji komplementarnej sekwencji dzięki parowaniu zasad
■S Wektor: czynnik (np. plazmid lub wirus) przenoszący informacje genetyczną S Cząsteczki adaptorowe: krótkie fragmenty DNA z jednej strony tępe, a z drugiej posiadające specjalnie przygotowane lepkie końce, właściwe dla danej restryktazy
■S Linkery: tępo zakończone sekwencje łącznikowe zawierające miejsca cięcia dla określonych restryktaz
Inżynieria genetyczna
• DNA jako podstawowy materiał dla inżynierii genetycznej
• Metody pracy z DNA:
1. Wydzielanie czystego DNA z komórek i tkanek na drodze homogenizacji polega na rozdrobnieniu mechanicznym fragmentu badanej tkanki w celu zniszczenia ich struktur komórkowych. Następnie to tak otrzymanej zawiesiny dodaje się detergentu powodującego rozpad błony komórkowej oraz uwolnienie DNA do roztworu. Kolejną czynnością jest dodanie proteazy (enzym trawiący białko), w celu oddzielenia od DNA towarzyszących mu białek, które są następnie