SYSTEMY DOSTARCZANIA GENÓW

W OBRĘBIE STAWÓW

ADENOWIRUSOWY SYSTEM TRANSFERU GENÓW

- OPARTY NA TYPOWYCH WIRUSACH WYWOŁUJĄCYCH ŁAGODNE

STANY ZAPLANE DRÓG ODDECHOWYCH

- INFEKUJĄ BARDZO WYDAJNIE SZEROKIE SPEKTRUM KOMÓREK

- MOŻLIWOŚĆ STOSOWANIA

IN VIVO

- KRÓTKOTRWAŁA EKSPRESJA WPROWADZONYCH GENÓW

- UTRUDNIONE WIELOKROTNE PODAWANIE

293 Cell - ekspresja

genu E1

kotransfekcja

produkcja rekombinowanych adenowirusów

E1

E1

Transgen

Shuttle plasmid

rekombinacja

E1

pA

ITR

ITR

ITR

genom adenowirusa z

usuniętym genem E1

KOMÓRKI 293

produkujące białko E1

PLAZMID NOŚNIKOWY

ADENOWIRUSOWY SYSTEM TRANSFERU GENÓW

RETROWIRUSOWY SYSTEM TRANSFERU GENÓW

- WIRUSY SKONSTRUOWANE SĄ W OPARCIU O WIRUSA MYSIEJ

BIAŁACZKI MOLONEY’A

- INFEKUJĄ DOSYĆ SZEROKIE SPEKTRUM KOMÓREK

- MOŻLIWOŚĆ WYSELEKCJONOWANIA ZMODYFIKOWANYCH

KOMÓREK

- MODYFIKACJA KOMÓREK

EX VIVO

- DŁUGOTRWAŁA EKSPRESJA WPROWADZONYCH GENÓW

(INTEGRACJA Z GENOMEM KOMÓRKI GOSPODARZA)

LTR

LTR

TRANSGENE

IRES

MARKER GENE

+

LTR

LTR

TRANSGEN

IRES

Neo

+

LTR

LTR

TRANSGENE

IRES

MARKER GENE

+

LTR

LTR

TRANSGENE

IRES

MARKER GENE

+

LTR

LTR

TRANSGENE

IRES

MARKER GENE

+

wektor retrowirusowy

transfekcja komórek pakujących

LTR

env

pA

LTR

pA

gag

pol

LTR

LTR

TRANSGENE

IRES

MARKER GENE

+

pączkujący retrowirus

KOMÓRKA PAKUJĄCA

rekombinowane

retrowirusy

USTALONA LINIA
TRANSDUKOWANYCH KOMÓREK

transdukcja komórek docelowych

NIEWIRUSOWE SYSTEMY TRANSFERU GENÓW

„NAGI DNA”

- WSTRZYKIWANIE CZYSTEGO DNA

- WYDAJNY SYSTEM TRANSFERU GENÓW DO KOMÓREK MIĘŚNIOWYCH

- NISKA WYDAJNOŚĆ TRANSFERU GENÓW DO PRZESTRZENI STAWOWEJ

LIPOSOMY

- OPŁASZCZENIE DNA WEWNĄTRZ KULISTYCH STRUKTUR SKŁADAJĄCYCH SIĘ Z

FOSFOLIPIDÓW

- NISKA WYDAJNOŚĆ TRANSFERU GENÓW DO PRZESTRZENII STAWOWEJ

STRATEGIE TERAPII GENOWEJ

W REUMATOIDALNYM ZAPALENIU STAWÓW

PATOGENEZA REUMATOIDALNEGO ZAPALENIA STAWÓW

ANTYGEN + LIMFOCYT T

WYDZIELANIE CYTOKIN

WYTWARZANIE NACZYŃ

(NEOWASKULARYZACJA)

AKTYWACJA MAKROFAGÓW

AKTYWACJA LIMFOCYTÓW B

PROLIFERACJA FIBROBLASTÓW I PRODUKCJA

ENZYMÓW PROTEOLITYCZNYCH

WYDZIELANIE CYTOKIN

(IL-1, TNF-alfa, IL-6)

PRODUKCJA CZYNNIKA

REUMATOIDALNEGO

I PRZECIWCIAŁ KL. IgG

AKTYWACJA OSTEOKLASTÓW

EROZJA W CHRZĄSCE, KOŚCI PODCHRZĘSTNEJ, TOREBCE STAWOWEJ I WIĘZADŁACH

FAZA ZAPALNA

FAZA PROLIFERACYJNA

ZASTOSOWANIE ANTAGONISTY RECEPTORA IL-1

WYDZIELANIE ENZYMÓW PROTEOLITYCZNYCH

IL-1

FIBROBLASTY Z

RECEPTORAMI DLA IL-1

ADENOWIRUS ZAWIERAJĄCY

GEN KODUJĄCY BIAŁKO

BLOKUJĄCE RECEPTOR DLA IL-1

WYPRODUKOWANE

BIAŁKO – ANTAGONISTA

RECEPTORA IL-1

WYDZIELANIE ENZYMÓW PROTEOLITYCZNYCH

ZABLOKOWANIE

RECEPTORÓW DLA IL-1

ZASTOSOWANIE INTERLEUKINY 10 (IL-10)

WYDZIELANIE CYTOKIN

(IL-1, TNF-alfa, IL-6, IFN-gamma, IL-8)

PROLIFERACJA FIBROBLASTÓW

WZMACNIANIE REAKCJI ZAPALNEJ

AKTYWOWANE LIMFOCYTY I MAKROFAGI

ADENOWIRUS ZAWIERAJĄCY

GEN IL-10

IL-10

WYDZIELANIE CYTOKIN

(IL-1, TNF-alfa, IL-6, IFN-gamma, IL-8)

WZMACNIANIE REAKCJI ZAPALNEJ

PROLIFERACJA FIBROBLASTÓW

HAMOWANIE AKTYWOWANYCH LIMFOCYTÓW I MAKROFAGÓW

ZASTOSOWANIE BIAŁKA FasL

AKTYWOWANE LIMFOCYTY ORAZ

PROLIFERUJĄCE FIBROBLASTY MAJĄ

NA SWOJEJ POWIERZCHNI RECEPTOR FAS

ADENOWIRUS ZAWIERAJĄCY

GEN FasL

FasR

FasR

FasR

FasR

AKTYWOWANE LIMFOCYTY ORAZ

PROLIFERUJĄCE FIBROBLASTY MAJĄ

NA SWOJEJ POWIERZCHNI RECEPTOR FAS

BIAŁKO FasL

FasR

FasR

BIAŁKO FasL ŁĄCZY SIĘ Z

RECEPTORAMI Fas (FasR)

NA AKTYWOWANYCH KOMÓRKACH

BIAŁKO FasL

FasR + FasL

FasR + FasL

INICJACJA APOPTOZY

(PROGRAMOWANEJ ŚMIERCI KOMÓRKI)

AKTYWOWANYCH LIMFOCYTÓW

ORAZ FIBROBLASTÓW

HAMOWANIE WEWNĄTRZKOMÓRKOWYCH SZLAKÓW

TRANSDUKCJI SYGNAŁU

ELEMENTY TRANSDUKCJI SYGNAŁU

np. KINAZY SRC, CZYNNIK NF-kB

AKTYWACJA PROCESÓW JĄDROWYCH

ODPOWIEDZIALNYCH ZA PROLIFERACJĘ KOMÓREK

ORAZ WYDZIELANIE CYTOKIN

PRZEZ LIMFOCYTY

RECEPTOR NA POWIERZCHNI

KOMÓRKI AKTYWOWANY PRZEZ

CYTOKINY

JĄDRO

ADENOWIRUS ZAWIERAJĄCY

GENY CZYNNIKÓW BLOKUJĄCYCH

TRANSDUKCJĘ SYGNAŁU

JĄDRO

EKSPRESJA GENÓW KODUJĄCYCH

CZYNNIKI BLOKUJĄCE

ELEMENTY TRANSDUKCJI SYGNAŁU

JĄDRO

BLOKOWANIE TRANSDUKCJI

SYGNAŁU DO JĄDRA

KOMÓRKOWEGO

JĄDRO

BLOKOWANIE TRANSDUKCJI

SYGNAŁU DO JĄDRA

KOMÓRKOWEGO

AKTYWACJA PROCESÓW JĄDROWYCH

ODPOWIEDZIALNYCH ZA PROLIFERACJĘ

ORAZ WYDZIELANIE CYTOKIN

PRZEZ LIMFOCYTY

JĄDRO

HAMOWANIE PROLIFERACJI KOMÓREK

FIBROBLASTY DZIELĄCE SIĘ W OBRĘBIE STAWU

ADENOWIRUS ZAWIERAJĄCY

GEN p16

EKSPRESJA GENU p16

W ZMODYFIKOWANEJ KOMÓRCE

BIAŁKO p16

HAMUJE PODZIAŁY KOMÓRKOWE

KONIEC