Katedra Mikrobiologii

Uniwersytet Gda

ń

ski

Ć

wiczenia z immunologii

dla studentów II roku Biologii studiów
stacjonarnych

Anna-Karina Kaczorowska

Opracowała: dr Anna-Karina Kaczorowska, 2 kwietnia 2009

Katedra Mikrobiologii UG

-2-

Program

ć

wicze

ń

z immunologii.

Zaj

ę

cia laboratoryjne poprzedzone s

ą

wej

ś

ciówk

ą

Tydzie

ń

semestru

Program

ć

wicze

ń

V

Reakcje serologiczne w diagnostyce bakterii z rodzajów Staphylococcus i
Streptococcus

Lateksowe testy aglutynacji.
Barwienie metod

ą

Grama. Wykrywanie aktywno

ś

ci katalazy.

Zagadnienia teoretyczne na wej

ś

ciówk

ę

:

Reakcje immunologiczne wykorzystywane w diagnostyce. Precypitacja probówkowa.
Precypitacja w

ż

elu i jej zastosowania. Aglutynacja. Odczyn biernej hemaglutynacji.

Test hamowania aglutynacji. Serotypowanie. Typy antygenów bakteryjnych.

Charakterystyka czynników wirulencji gronkowca złocistego oraz paciorkowców (białko
A, czynnik koaguluj

ą

cy osocze, białko M, bakteryjne deoksyrybonukleazy). Działanie

katalazy.

VIII

Interakcje gospodarz-patogen.

I. Analiza struktury genu ccr5 warunkuj

ą

cego oporno

ść

na zaka

ż

enie szczepami

HIV-1 R5

– izolacja genomowego DNA, reakcja PCR.

II. Unikanie odpowiedzi immunologicznej przez bakterie

– wykrywanie szczepów bakterii wytwarzaj

ą

cych zewn

ą

trzkomórkowe

deoksyrybonukleazy. Bakterie oporne na działanie lizozymu.

Zagadnienia teoretyczne na wej

ś

ciówk

ę

:

Substancje o działaniu przeciwbakteryjnym zawarte w wydzielinach

ś

luzowo-

surowiczych. Fagocytoza. Tlenowe i beztlenowe mechanizmy zabijania przez komórki

ż

erne. Bakteryjne mechanizmy unikania odpowiedzi immunologicznej, funkcja otoczki,

modyfikacje w strukturze peptydoglikanu, termostabline endonukleazy. Sieci
neutrofilowe.

Amplifikacja DNA i RNA przy pomocy ła

ń

cuchowej reakcji polimerazy.

wirus HIV i receptor CCR5:

Co to jest CCR5, jaka jest jego fizjologiczna rola?
Jaka jest ogólna rola chemokin, co to s

ą

chemokiny z grupy CC lub

grupy

β

Co oznacza skrót

3p21.31 w odniesieniu do genu ccr5

Jaka jest dystrybucja zmutowanego allelu - czy frekwencja wyst

ę

powania tego allelu

w niektórych populacjach wskazuje,

ż

e istnieje jaka

ś

presja selekcyjna, która wpływa

na utrzymywanie si

ę

tej mutacji?

Jak mutacja allelu wpływa na zdrowie nosicieli zmutowanego allelu – czy istnieje
ró

ż

nica pomi

ę

dzy osobnikami heterozygotycznymi a homozygotami?

Czy mutacj

ę

cc

r5

∆

32

mo

ż

na okre

ś

li

ć

jako mutacj

ę

korzystn

ą

?

Opracowała: dr Anna-Karina Kaczorowska, 2 kwietnia 2009

Katedra Mikrobiologii UG

-3-

Mechanizm internalizacji HIV. W jaki sposób wirus dostaje si

ę

do wn

ę

trza komórki

(udział białka gp120 i gp40 w tym procesie)? Wymie

ń

przykłady cz

ą

steczek słu

żą

cych

jako receptory dla przył

ą

czenia si

ę

wirusa; podaj przykład innego wirusa ni

ż

HIV

Czy wszystkie szczepy wirusa charakteryzuj

ą

si

ę

tym samym tropizmem

komórkowym?
Cykl rozwojowy wirusa HIV. Jak wygl

ą

da genom wirusa HIV. Co to jest sekwencja

LTR?

Odpowiedzi na te pytania prosz

ę

szuka

ć

w:

podr

ę

czniku Immunologia pod redakcj

ą

J. Goł

ę

bia, M Jakóbisiaka i W. Laska.

PWN, Warszawa, wydanie z 2004 r lub nast

ę

pne.

•

31.1 Zespół nabytego niedoboru odporno

ś

ci (AIDS)

•

15.7 Chemokiny

oraz publikacjach dost

ę

pnych w Public Medline i na platformie Modle

•

Blanpain C, Lee B, Tackoen M, Puffer B, Boom A, Libert F, Sharron M,

Wittamer V, Vassart G, Doms RW, Parmentier M. Multiple nonfunctional
alleles of CCR5 are frequent in various human populations. Blood.
96:1638-45, 2000.

•

Lim JK, Glass WG, McDermott DH, Murphy PM. CCR5: no longer a "good for

nothing" gene-chemokine control of West Nile virus infection. Trends
Immunol. 27:308-12, 2006.

•

McNicholl JM, Smith DK, Qari SH, Hodge T. Host genes and HIV: the role of

the chemokine receptor gene CCR5 and its allele. Emerg Infect Dis. 3:261-
71,1997.

IX

Wykorzystanie przeciwciał monoklonalnych w diagnostyce medycznej

Analiza wyników poprzedniego

ć

wiczenia – rozdział elektroforetyczny produktów

amplifikacji.

Podczas elektroforezy DNA - immunochromatograficzne testy paskowe

Zagadnienia teoretyczne na wej

ś

ciówk

ę

:

Otrzymywanie surowicy poliwalentnej. Otrzymywanie i zastosowanie przeciwciał
monoklonalnych. Zasada działania testów immunoenzymatycznych; enzymy
wykorzystywane w testach immunoenzymatycznych. Test ELISA. Testy
radioimmunologiczne. Testy immuchromatograficzne. Zasada działania paskowego
testu ci

ąż

owego oraz testu wykrywaj

ą

cego amfetamin

ę

.

Opracowała: dr Anna-Karina Kaczorowska, 2 kwietnia 2009

Katedra Mikrobiologii UG

-4-

Ć

WICZENIE 3

(IX tydzie

ń

semestru letniego)

Wykorzystanie przeciwciał monoklonalnych w diagnostyce medycznej.

Na dzisiejszych zaj

ę

ciach przeprowadzimy elektroforez

ę

agarozow

ą

produktów amplifikacji fragmentu genu

ccr5, by stwierdzi

ć

, czy jeste

ś

cie nosicielami dzikiego ccr5-wt czy zmutowanego ccr5

∆

32 allelu receptora

CCR5.

W trakcie rozdziału elektroforetycznego waszych próbek, zapoznacie si

ę

z paskowymi testami

diagnostycznymi wykrywaj

ą

cymi:

1)

gonadotropin

ę

kosmówkow

ą

(hCG) w moczu kobiety - test ci

ąż

owy

2)

amfetamin

ę

w moczu

3)

paciorkowce grupy A w wymazie z gardła pacjenta

Do

ś

wiadczenie 3.1

Rozdział elektroforetyczny amplifikowanych próbek.

Studenci przygotowuj

ą

2%

ż

el agarozowy.

(W tym celu nale

ż

y przygotowa

ć

2% roztwór agarozy w TBE 1

×

.

W studzienki

ż

elu ka

ż

dy student nanosi trzy swoje próbki do których dodaje 4

µ

l buforu obci

ąż

aj

ą

cego:

1. 5

µ

l matrycowego DNA zawieszonego w 20

µ

l wody z 5

µ

l buforu obci

ąż

aj

ą

cego

2. 20

µ

l próbki K po amplifikacji

3. 20

µ

l próbki T po amplifikacji

Ponadto na

ż

el nale

ż

y nanie

ść

wzorzec masowy DNA np. 100bp DNA Ladder firmy New England Biolabs

(nr katalog. #N3231S)

Rozdział nale

ż

y prowadzi

ć

w buforze TBE (1

×

) przy stałym nat

ęż

eniu pr

ą

du wynosz

ą

cym 30mA przez około 2

godziny. W wyniku amplifikacji dzikiego allelu wt-ccr5 na

ż

elu obserwowa

ć

b

ę

dziemy pr

ąż

ek o długo

ś

ci 225

pz. Produkt amplifikacji allelu z delecj

ę

32 pz b

ę

dzie odpowiednio krótszy. U osób, które s

ą

heterozygotami

W/

∆

32 widoczne b

ę

d

ą

dwa pr

ąż

ki DNA.

Zanotuj wynik elektroforezy. Czy kto

ś

z Twojej grupy jest nosicielem mutacji ccr5

∆

32?

Opracowała: dr Anna-Karina Kaczorowska, 2 kwietnia 2009

Katedra Mikrobiologii UG

-5-

Paskowe testy diagnostyczne

W praktyce laboratoryjnej reakcje immunologiczne odgrywaj

ą

wa

ż

n

ą

rol

ę

w diagnozowaniu stanu zdrowia. Do

jednych z najcz

ęś

ciej stosowanych testów immunologicznych w laboratoriach diagnostycznych nale

żą

i m m u n o e n z y m a t y c z n e t e s t y E L I S A i t e s t y a g l u t y n a c j i l a t e k s o w e j .

Wszystkie odczynniki ludzkiego pochodzenia zawarte w zestawach diagnostycznych (surowice kontrolne) s

ą

przebadane i nie zawieraj

ą

antygenu powierzchniowego HBS-Ag wirusa

ż

ółtaczki typu B oraz przeciwciał anty-HIV.

Pomimo tego,

ż

e surowice s

ą

pozyskiwane od osób zdrowych, materiały te powinny by

ć

traktowane jako

potencjalnie zaka

ź

ne.

W niektórych przypadkach mo

ż

liwe jest nawet wykonywanie takich testów w domu. Do takich testów

nale

żą

p a s k o w e t e s t y i m m u n o c h r o m a t o g r a f i c z n e s t o s o w a n e d o w y k r y w a n i a w m o c z u

h o r m o n ó w l u b s u b s t a n c j i p s y c h o a k t y w n y c h takich jak amfetamina, morfina, kokaina i
marihuana itp.

W paskowych testach immunochromatograficznych wykorzystuje si

ę

zwykle układ kilku rodzajów

przeciwciał monoklonalnych swoistych wobec ró

ż

nych epitopów tego samego antygenu, które naniesione

s

ą

w ró

ż

nych miejscach na membran

ę

lub nitroceluloz

ę

.

Do

ś

wiadczenie 3.2

Paskowy test ci

ąż

owy

Stosowane obecnie domowe testy ci

ąż

owe s

ą

przykładami testów immunoenzymatycznych.

Oparte s

ą

one na wykrywaniu w moczu kobiet gonadotropiny kosmówkowej (hCG) przy st

ęż

eniu 25 mIU

hormonu na ml moczu. Wysoka czuło

ść

tych testów pozwala na wykrycie ci

ąż

y dzie

ń

po spodziewanej

miesi

ą

czce.

W prezentowanym na

ć

wiczeniach te

ś

cie wykorzystane s

ą

trzy rodzaje przeciwciał:

monoklonalne przeciwciała A wyznakowane zabarwionymi cz

ą

stkami lateksu wykazuj

ą

swoisto

ść

wobec ła

ń

cucha

β

ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej; cz

ą

steczki tych immunoglobulin nie s

ą

zwi

ą

zane z membran

ą

testow

ą

; przeciwciała te wi

ążą

hormon hCG obecny w próbce moczu

przeciwciała B swoiste wobec ła

ń

cucha

α

gonadotropiny s

ą

zwi

ą

zane z membran

ą

testow

ą

(unieruchomione) na wysoko

ś

ci litery T (ang. Test) w okienku odczytu; przeciwciała te wi

ążą

kompleks

gonadotropina-przeciwciała A,

przeciwciała C zwi

ą

zane s

ą

z membran

ą

testow

ą

i unieruchomione na wysoko

ś

ci litery C (ang.

Control) w okienku odczytu; cz

ą

steczki tych przeciwciał wi

ążą

znakowane przeciwciała A (kontrola

poprawno

ś

ci wykonania testu).

Gonadotropina kosmówkowa jest
wytwarzana przez komórki trofoblastu
zanim jeszcze nast

ą

pi implantacja

zarodka. Jej obecno

ść

mo

ż

na wykry

ć

ju

ż

w 7-10 dni po zapłodnieniu.

W prawidłowej ci

ąż

y poziom hCG

zasadniczo ro

ś

nie wykładniczo (podwaja

si

ę

co dwa dni) a

ż

do 10 tygodnia ci

ąż

y.

Zakres normy jest bardzo szeroki.
Hormon składa si

ę

z dwóch ła

ń

cuchów

α

i

β

. Ła

ń

cuch

α

wyst

ę

puje tak

ż

e w

innych hormonach: luteinizuj

ą

cym (hLH),

folikulotropowym (hFSH) i tyreotropinie
(hTSH).

Opracowała: dr Anna-Karina Kaczorowska, 2 kwietnia 2009

Katedra Mikrobiologii UG

-6-

Zasada działania testu

Je

ś

li mocz nie zawiera gonadotropiny, niezwi

ą

zane z błon

ą

, znakowane immunoglobuliny swoiste wobec

ła

ń

cucha

β

hormonu hCG migruj

ą

w gór

ę

testu siłami kapilarnymi i s

ą

wychwytywane dopiero przez

skierowane przeciw nim przeciwciała zwi

ą

zane z membran

ą

na wysoko

ś

ci litery C.

Je

ż

eli w badanym moczu obecna jest gonadotropina kosmówkowa (hCG), to jej cz

ą

steczki po naniesieniu na

pasek testowy (okienko S) s

ą

wychwytywane przez znakowane przeciwciała monoklonalne swoiste wobec

ła

ń

cucha

β

niezwi

ą

zane z membran

ą

. Kompleksy przeciwciała A - hormon migruj

ą

siłami kapilarnymi w gór

ę

membrany i s

ą

zatrzymywane przez swoiste wobec ła

ń

cucha

α

hCG przeciwciała monoklonalne, które s

ą

zwi

ą

zane membran

ą

(okienko odczytu, na wysoko

ś

ci litery T).

Opracowała: dr Anna-Karina Kaczorowska, 2 kwietnia 2009

Katedra Mikrobiologii UG

-7-

Nadmiar niezwi

ą

zanych znakowanych przeciwciał migruje dalej i jest wychwytywany przez zwi

ą

zane

z membran

ą

przeciwciała skierowane przeciwko mobilnym przeciwciałom typu (okienko odczytu, na

wysoko

ś

ci litery C).

Wykonanie testu:

1) Przy u

ż

yciu pipety umie

ść

3 krople moczu w polu (S) na płytce testowej.

2) Po 3 minutach odczytaj test.

Je

ż

eli po upływie 3 minut nie obserwujesz pojawienia si

ę

zabarwionej linii w polu kontrolnym, oznacza to,

ż

e

test nale

ż

y uzna

ć

za niewa

ż

ny.

W zale

ż

no

ś

ci od st

ęż

enia hormonu w moczu – wynik w postaci zabarwionej linii w okienku testowych mo

ż

e

pojawi

ć

si

ę

w czasie krótszym ni

ż

1 minuta. Przy niskim st

ęż

eniu hCG po czasie dłu

ż

szym ni

ż

3 minuty w

okienku testowym na wysoko

ś

ci litery T mo

ż

e pojawi

ć

si

ę

linia o słabym nat

ęż

eniu barwy.

Nie nale

ż

y odczytywa

ć

wyniku testu po czasie dłu

ż

szym ni

ż

10 minut.

Do

ś

wiadczenie 3.2

Test wykrywaj

ą

cy w moczu amfetamin

ę

Test na wykrywania amfetaminy jest przykładem chromatograficznego testu opartego na zasadzie
immunokompetycji.

W prezentowanym te

ś

cie INSTALERT

TM

AMP wykorzystane

s

ą

dwa typy przeciwciał oraz koniugat białko-amfetamina.

Pierwsze z tych immunoglobulin to wyznakowane złotem
koloidalnym mysie przeciwciała monoklonalne przeciwko
amfetaminie; cz

ą

steczki tego przeciwciała nie s

ą

zwi

ą

zane

z membran

ą

testow

ą

.

Drugi rodzaj immunoglobulin to zwi

ą

zane z membran

ą

testow

ą

(unieruchomione) kozie przeciwciała skierowane

przeciwko przeciwciałom mysim. Immunoglobuliny te wi

ążą

przeciwciała mysie swoiste wobec amfetaminy (kontrola
poprawno

ś

ci wykonania testu).

Koniugat białko-amfetamina zwi

ą

zany jest z membran

ą

na

wysoko

ś

ci litery T. Unieruchomione cz

ą

steczki amfetaminy

konkuruj

ą

z narkotykiem zawartym w próbce o miejsca

wi

ążą

ce antygen w obr

ę

bie monoklonalnych przeciwciał –

st

ą

d nazwa testu.

Wykonanie testu:

1) Przy u

ż

yciu pipety umie

ść

3 krople moczu w polu (S) na płytce testowej.

2) Po 5 minutach odczytaj test.

Nie nale

ż

y odczytywa

ć

wyniku testu po czasie dłu

ż

szym ni

ż

10 minut.

Opracowała: dr Anna-Karina Kaczorowska, 2 kwietnia 2009

Katedra Mikrobiologii UG

-8-

Zasada działania testu

Je

ż

eli w moczu nie ma narkotyku,

to roztwór moczu i wyznakowanych koloidalnym
złotem cz

ą

steczek mysich przeciwciał przeciwko

amfetaminie migruje wzdłu

ż

membrany siłami

kapilarnymi.

Swoiste mysie przeciwciała po napotkaniu
zwi

ą

zanego z membran

ą

koniugatu białko-

amfetaminia wi

ążą

si

ę

z amfetamin

ą

tworz

ą

c

widoczn

ą

barwn

ą

lini

ę

w okienku odczytu przy literze

T (ang. Test).

Niezwi

ą

zane znakowane cz

ą

steczki mysich

przeciwciał migruj

ą

dalej wzdłu

ż

membrany i zostaj

ą

zwi

ą

zane przez skierowane przeciwko nim

przeciwciała kozie. W okienku odczytu na wysoko

ś

ci

litery C (ang. Control) widoczna jest drug

ą

barwn

ą

linia.

Je

ż

eli w moczu znajduje si

ę

amfetamina to

substancje te po naniesieniu na pasek testowy
wi

ążą

si

ę

z wyznakowanymi mysimi

monoklonalnymi przeciwciałami przeciwko
amfetaminie. Je

ż

eli tego narkotyku jest odpowiednio

du

ż

o (powy

ż

ej 1000 ng/ml moczu) to nast

ę

puje

wysycenie nim wszystkich mysich przeciwciał
obecnych w pasku testowym. W konsekwencji
wysycone amfetamin

ą

mysie przeciwciała nie mog

ą

zwi

ą

za

ć

si

ę

na wysoko

ś

ci litery T okienka odczytu

z unieruchomionymi cz

ą

steczkami koniugatu białko-

amfetamina. Natomiast mo

ż

na zaobserwowa

ć

barwn

ą

lini

ę

w okienku odczytu na wysoko

ś

ci litery

C (ang. Control) co

ś

wiadczy,

ż

e test wykonano

prawidłowo.

Opracowała: dr Anna-Karina Kaczorowska, 2 kwietnia 2009

Katedra Mikrobiologii UG

-9-

Do

ś

wiadczenie 3.2

Test wykrywaj

ą

cy antygen grupowy A paciorkowców w wymazie

Paciorkowce

β

-hemolizuj

ą

ce grupy A stanowi

ą

przyczyn

ę

ok. 15% przypadków zapale

ń

gardła u dzieci w

wieku 3 miesi

ę

cy do 5 lat. W wieku szkolnym i u dorosłych cz

ę

stotliwo

ść

infekcji spowodowanych

paciorkowcami grupy A wynosi ok. 40%.

Test VIKIA



Strepto A (firmy bioMérieux) umo

ż

liwia lekarzowi przeprowadzenie szybkiego badania wymazu z

gardła pacjenta w kierunku obecno

ś

ci paciorkowców

β

-hemolizuj

ą

cych z grupy A. Test wykorzystuje

przeciwciała swoiste wobec antygenów paciorkowców grupy A (np. Streptococcus pyogenes). Mo

ż

na go

wykona

ć

w gabinecie lekarskim bez konieczno

ś

ci izolacji i hodowania bakterii z wymazu.

Test VIKIA



Strepto A wykorzystuje trzy typy przeciwciał:

•

niezwi

ą

zane z membran

ą

znakowane barwionymi cz

ą

stkami lateksu poliklonalne przeciwciała przeciwko

antygenowi grupowemu A;

•

znajduj

ą

si

ę

przeciwciała przeciwko antygenowi grupowemu A zwi

ą

zane z membran

ą

odczytu na

wysoko

ś

ci litery T ;

•

w okienku odczytu znajduj

ą

przeciwciała wi

ążą

ce znakowane przeciwciała poliklonalne zwi

ą

zane z

membran

ą

na wysoko

ś

ci litery C.

Zasada działania testu

Je

ż

eli w badanej próbce jest obecne s

ą

paciorkowce z grupy A, to wyekstrahowane antygeny grupowo-

swoiste A, po naniesieniu na pasek testowy (okienko S), s

ą

wychwytywane przez znakowane przeciwciała

poliklonalne niezwi

ą

zane z membran

ą

. Takie kompleksy znakowane przeciwciała - antygen A migruj

ą

wzdłu

ż

membrany siłami kapilarnymi i s

ą

zatrzymywane na wysoko

ś

ci litery T przez zwi

ą

zane z membran

ą

przeciwciała swoiste wobec antygenu grupowego A. W okienku testowym na wysoko

ś

ci litery T pojawia si

ę

wówczas ró

ż

owo-fioletowa linia.

Nadmiar niezwi

ą

zanych wyznakowanych przeciwciał migruje dalej i jest wychwytywany przez zwi

ą

zane z

membran

ą

przeciwciała skierowane przeciwko znakowanym przeciwciałom przeciwko antygenowi

grupowemu A (okienko odczytu, na wysoko

ś

ci litery C). Schemat wykonania testu przedstawia Rys. 4.

Wykonanie testu:

1. Doda

ć

4 krople Odczynnika R5 (2 M azotyn sodu) do probówki testowej R2 (Odczynnik R5 ma czerwony

kolor). Nast

ę

pnie do tej samej probówki doda

ć

4 krople bezbarwnego Odczynnika R6 (0,4 M kwas

octowy). Cało

ść

delikatnie wymiesza

ć

przez obracanie probówk

ą

testow

ą

. Dodanie Odczynnika R6 do

Odczynnika R5 zmienia jego zabarwienie z czerwonego na

ż

ółty.

2. Wykona

ć

wymaz z gardła i natychmiast zanurzy

ć

wymazówk

ę

w roztworze przygotowanym w poprzednim

punkcie. Obróci

ć

wymazówk

ę

w probówce kilka razy, a nast

ę

pnie zostawi

ć

j

ą

na 1 minut

ę

w probówce R2

celem ekstrakcji grupowego antygenu paciorkowców typu A. Po tym czasie odcisn

ąć

wymazówk

ę

na

ś

ciankach probówki. Wyrzuci

ć

wymazówk

ę

.

3. Nało

ż

y

ć

zakraplacz R4 na probówk

ę

testow

ą

R2. Umie

ś

ci

ć

3 krople ekstraktu w polu (S) na płytce

testowej. Wł

ą

czy

ć

minutnik. Odczeka

ć

do pojawienia si

ę

reakcji barwnej. Wynik odczyta

ć

po 5 minutach.

Nie nale

ż

y odczytywa

ć

wyników pó

ź

niej ni

ż

po 10 minutach.

Opracowała: dr Anna-Karina Kaczorowska, 2 kwietnia 2009

Katedra Mikrobiologii UG

-10-

Rys. 4. Schemat wykonania testu VIKIA Strepto



A na wykrywanie paciorkowców grupy A w wymazach z

gardła. Rysunek z ulotki informacyjnej firmy bioMérieux.

Dostawcy u

ż

ytych na zaj

ę

ciach testów diagnostycznych

1) Test ci

ąż

owy. Quick-check

TM

Early Detection One Step Pregnancy Test. Producent: ACON Laboratories, Inc. , USA

(www.aconlabs.com). Importer: EMAPOL (www.emapol.com.pl), ul. Budowlanych 68, 80-298 Gda

ń

sk, tel. [phone]; nr

katalogowy FHC-102/1.

2) Test na wykrywanie amfetaminy. INSTALERT

TM

AMP One Step Amphetamine Test. Producent: Innovacon, Inc. , USA

(www.innovaconinc.com). Importer: EMAPOL (www.emapol.com.pl), ul. Budowlanych 68, 80-298 Gda

ń

sk, tel. [phone]; nr

katalogowy DAM-102/5.

3) Test na wykrywanie paciorkowców grupy A w wymazach z gardła. VIKIA



Strepto A. Producent: bioMérieux

(www.biomerieux.pl); ul.

Ż

eromskiego 17, 01-882 Warszawa, tel. [phone]., nr katalogowy 31114.