A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej

1

CHROMATOGRAFIA

CIENKOWARSTWOWA

Kolejne slajdy przedstawiają poprawny sposób

postępowania podczas analizy próbki związku

organicznego przy zastosowaniu techniki chromatografii

cienkowarstwowej (TLC).

A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej

2

Krok 1

Przygotowanie:

 roztworu analizowanej substancji oraz roztworów wzorcowych,

 płytki chromatograficznej o odpowiednich rozmiarach,

 komory chromatograficznej wyłożonej bibułą z właściwym
eluentem,

 lampy UV (w przypadku analizy substancji bezbarwnych)

TLC

A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej

3

Krok 2

Zaznaczenie ołówkiem linii
startu oraz punktów, w których
będzie nanoszony roztwór
analizowany (X) oraz roztwory
wzorcowe (A i B)

TLC

A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej

4

Krok 3

Nanoszenie na zaznaczone uprzednio na płytce miejsca
analizowanych roztworów przy użyciu wąskiej kapilary.

TLC

UWAGA: Każdy roztwór musi być nanoszony inną, czystą
kapilarą!

A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej

5

Krok 4

Umieszczenie przygotowanej płytki w komorze
chromatograficznej:

TLC

 Eluent w komorze nie może sięgać do dolnej krawędzi

plamek!

 Raz wstawionej płytki nie wolno już poprawiać!

 Płytka powinna stać prawie pionowo, lecz jej boczne

krawędzie nie mogą dotykać ani bibuły, ani ścianek naczynia!

UWAGI:

poziom
eluenta

A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej

6

Krok 5

Rozwijanie chromatogramu do czasu, aż czoło rozpuszczalnika
znajdzie się w odległości 3 – 5 mm od górnej krawędzi płytki.

TLC

UWAGA: Podczas rozwijania chromatogramu komory nie wolno poruszać!

A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej

7

Krok 6

TLC

Obliczanie R

f

dla plamki

wzorcu A:

R

f

(A) = a / d

R

f

(A) = 38,5 mm / 51,0

mm

R

f

(A) = ok. 0,75

Wyjęcie płytki z komory, zaznaczenie miejsca, do którego doszło
czoło rozpuszczalnika (tzw. linii mety) i wysuszenie płytki.

Krok 7

Obejrzenie płytki w świetle UV, zaznaczenie wszystkich plamek,
obliczenie dla nich współczynnika R

f

i interpretacja

chromatogramu.