Rodzaje preparatów

mikroskopowych, oraz metody

ich barwienia

Preparaty mikroskopowe

Warunki jakie powinien spełniać preparat

musi być przejrzysty

powinien być odpowiednio skontrastowany (wybarwiony)

struktura komórek i tkanek w

preparacie winna być jak

najbardziej zbliżona do struktury

tkanki żywej

Rodzaje preparatów mikroskopowych

Preparaty mikroskopowe dzielimy na:

Preparaty mikroskopowe dzielimy na:

skrawki

szlify

rozmazy

rozgnioty

odciski narządowe

preparaty
całościow
e

Preparat skrawkowy wykonany z pelargonii

Szlif kostny

Rozmaz krwi

Czynności towarzyszące tworzeniu

preparatów mikroskopowych

Utrwalanie

Wypłukiwanie utrwalacza

Odwadnianie

Zatapianie w
parafinie i
formowanie
bloczków

Barwienie,
płukanie i
zamykanie
preparatu

Barwienie preparatów mikroskopowych

•

Barwienie ma na
celu
skontrastowanie
struktur
komórkowych i
tkankowych za
pomocą
zróżnicowanych
barwników.

Preparat cytologiczny wymazu z
szyjki macicy (barwienie
hematoksyliną i eozyną).

•

Najpopularniejsze rodzaje barwień

Barwienie

barwnikami

kwaśnymi (eozyna,

floksyna, oranż G)

i zasadowymi

(hematoksylina,

błękit metylenowy,

safranina)

Barwienie przyżyciowe

(czerwień obojętna,

błękit metylenowy,

toluidynowy i tusz

chiński)

Impregnowanie
solami metali
(srebra, złota)

Bejcowanie

Różnicowanie

Fluorescencja

Jest to zjawisko

Jest to zjawisko

emitowania

emitowania

przez niektóre

przez niektóre

substancje

substancje

światła

światła

własnego,

własnego,

wywołane

wywołane

naświetleniem

naświetleniem

z zewnątrz

z zewnątrz

Barwienie fluorescencyjne, fluorescencja

naturalna

•

Barwniki

Barwniki

fluorescencyjne

fluorescencyjne

używane są do

używane są do

znakowania

znakowania

interesujących nas

interesujących nas

molekuł (poprzez

molekuł (poprzez

wiązanie się z nimi)

wiązanie się z nimi)

w utrwalonych i

w utrwalonych i

żywych komórkach

żywych komórkach

Fluorestencja naturalna
chlorofilu

Fluorescencja sztuczna

•

Polega na

Polega na

znakowaniu

znakowaniu

wybranych

wybranych

elementów

elementów

komórkowych przez

komórkowych przez

specyficzne sondy

specyficzne sondy

(związki łączące się z

(związki łączące się z

odpowiednimi

odpowiednimi

strukturami

strukturami

komórkowymi).

komórkowymi).

Przykłady sond fluorescencyjnych

Sonda fluorescencyjna DAPI
i wyznakowane nią jądra
komórek drożdży

m

m

Sonda MitoTrackerGreen i
wyznakowane nią
mitochondria komórek
drożdży

w

w

Sonda Arg-CMAC i
wyznakowane nią wakuole
komórek drożdży

Aktyna znakowana sondą

fluorescencyjną

Rhodamine – Phalloidin

Źródła

Źródła

•

Skrypt do ćwiczeń z Biologii komórki

Skrypt do ćwiczeń z Biologii komórki

•

www.bioinfo.mol.uj.edu.pl

www.bioinfo.mol.uj.edu.pl

•

www.biotechnolog.pl

www.biotechnolog.pl

•

www.e-biotechnologia.pl

www.e-biotechnologia.pl