1.

niestabilność plazmidów - jak sobie z tym radzić

RT-PCR

wektory kosmidowe, przykłady

2.

metody transformacji B. subtilis

plazmidy drożdżowe

wektory bifunkcjonalne, przykład E. coli

odwrotna transkryptaza - charakterystyka + zastosowanie

3.

plazmidy - cechy, działanie Amp i Tet, geny oporności

sztuczny chromosom drożdżowy - rysunek

immunologiczna/immunochemiczna metoda (wykrywania genów w bibliotece

genowej)

(białka w podłożu, jak jest ekspresja genów)

4.

enzymy restrykcyjne (dokładnie wszystko, przykład lepkich końców,

sekwencje palindromowe) - endonukleazy

przykłady plazmidów do wykorzystania końcowego oczyszczania produktów

-> metki wzory cukrów (maltoza, glukoza, skrobi, amyloza, wiązania w

amylopektynie, budowa)

biblioteka genów (cDNA - gdzie - Eukaryota, struktura genu

nieciągła)

5.

polimorfizm fragmentów miejsc restrykcyjnych - zasada + zastosowanie

metody bezpośrednie (białka, tłuszcze, wiązania) określania postępu

reakcji w czasie rzeczywistym RT PCR - identyfikacji w bibliotece 5

przykładów, beta-galaktozydaza, X-gal

plazmidy wektorowe - budowa

6.

metody chybrydyzacji, sondy, jak się tworzy

rodzina PUC-ów, czym się charakteryzują

zasady upakowania in vitro - dwuszczepowa, jednoszczepowa, uszkodzony,

cos fragm. uszkodzone fragmenty odpowiedzialne za białka

7.

Pirosekwencjonowanie

Bakteriofag, def. wirusa, cykle bakteriofaga lambda, wykorzystanie

Klonowanie zasadą insercji inaktywacyjnej, inwertaza

8.

Wektor 2μm, wektory w drożdżach

sposoby łączenia DNA

chybrydyzacyjna metoda identyfikacji

Fosfataza alkaliczna

9.

PCR - ogólnie

ligazy bakteriofaga i E. coli

wektory fagowe wymienne i wtrąceniowe

10.

Represja kataboliczna (pozytywna, negatywna, operon laktozowy,

tryptofanowy)

rodzina PUC

bakteriofagi i wirusy (wektory bakteriofagowe)

11.

izolowanie i oczyszczanie kwasów nukleinowych z bakterii

charakterystyka bakteriofaga M13 (jenoniciowy genom, fagemidy, działają

jak PUCe, jaki wektor powstaje, cykl rozwojowy

(nigdy nie powoduje lizy komórek, konstrukcja wektora z wykorzystaniem lag

z' - jako pierwszy, wstawili polilinker)

fag wspomagający - faza 1-niciowa

insercja inaktywacyjna

inne pytania:

metoda elektroporacji

rodzaje enzymów

operon arabinozowy

A

sposoby łączenia DNA

izolowanie, oczyszczanie plazmidowego DNA

enzymy restrykcyjne

B

in-vitro

PUC

metody identyfikacji biblioteki genów

C

PCR

ligazy

wektory fagowe

D

in vitro

PUC-rodzina

metody indentyfikacji klonów w banku genów

E

transformacja Bacillus

odwrotna transkryptaza

2um plazmid

F

immunologiczne i immunochemiczne

transformacja E. coli

najczęściej powtarzające się: (w skali innych terminów)

bacillus

ligazy

odwrotna transkryptaza

transformacja coli

PCR

---