Spektroskopia w podczerwieni - IR

Spektroskopia podczerwieni obejmuje widmo promieniowania elekroomagnetycznego z zakresu między obszarem widzialnym, a obszarem mikrofalowym tzn. między 14300 a 200 cm-1(0,7 - 50 mm).

Podział:

podczerwień bliska

14300 -4000 cm-1 0,7 -2,5mm

podczerwień właściwa 4000 - 700 cm-1 2,5 - 14,3mm podczerwień daleka

700 - 200 cm-1 14,3 – 50mm

ƒ Absorpcji promieniowania w tym zakresie odpowiadają przejścia oscylacyjno (głównie) - rotacyjne.

ƒ Rotacje molekuł ciał stałych i cieczy są hamowane w skutek intensywności oddziaływań między cząsteczkowych. Wzbudzenia rotacyjne powodują jedynie zwiększenie szerokości pasm absorpcyjnych. Ich widma to widma oscylacyjne.

ƒ W fazie gazowej molekuły rotują stosunkowo swobodnie, => widmie gazu można zaobserwować oddzielne przejścia oscylacyjno - rotacyjne, => widma noszą nazwę widm oscylacyjno - rotacyjnych.

ƒ Porównanie widm IR dwóch substancji jest znakomitym testem ich identyczności

ƒ Spektroskopia w podczerwieni ma zasadnicze znaczenie w badaniach związków próchnicznych ;)

ƒ Im większa masa atomu, tym niższa częstotliwość absorbowanego promieniowania:

1

k

ν =

2 c

π

m m

1

2

m + m

1

2

k – stała energii wiązania

m – masy związanych atomów;

ƒ Potrójne wiązania charakteryzują się wyższymi częstotliwościami oscylacji niż odpowiadające podwójne wiązania, które z kolei mają wyższą częstotliwość od pojedynczego wiązania.

Zastosowanie:

Protein--non-ionic detergent interaction. Interaction of bovine serum albumin with alkyl glucosides studied by equilibrium dialysis and infrared spectroscopy.

Wasylewski Z, Kozik A.

The binding isotherms of bovine serum albumin with octylglucoside and decyl glucoside were determined at 7 degrees C and 25 degrees C at pH 7.4 and ionic strength 0.1 M. The average number of detergent molecules bound was found to increase with increasing hydrocarbon chain length. Competitive binding indicates that alkylglycosides combine with the same sites as alkyl sulphates. Native bovine serum albumin has about 12 and 10 sites for non-ionic ligands at 7 degrees C and about 15 and 13 sites at 25 degrees C for octyl and decyl glucosides respectively. The values for standard free energy changes--delta G0, were calculated from the intrinsic association constants. Fourier-transformed infrared spectroscopy was used to study the effects of alkyl glucosides on the conformation of albumin. The results obtained indicate that there are no significant changes in protein structure.

An in vivo OCT study of human natural accommodation in a 19-year-old albino.

With a normal subject, the morphological modifications of the crystalline lens behind the iris screen cannot be studied because the infrared light source used is blocked by the pigment epithelium. The absence of this pigment in an albino subject allowed us to study the modifications of the crystalline lens and the ciliary body during accommodation. In this study, we were able to definitely confirm all the modifications of the anterior segment as described by von Helmholtz in 1855, who, at the time, used very rudimentary optical procedures based on the reflections of a flame on the surface of the crystalline lens.