ïż




Enzymy restrykcyjne (endonukleazy restrykcyjne, restryktazy) endodeoksyrybonukleazy
-    odkryte 1970 r przez W. Arberta, D. Nathansona, O.H. Smitha
-    izolowane z bakterii lub sinic
stanowią ochronę komórki bakteryjnej przed obcym DNA (fagowym lub wirusowym)
-    rozpoznajÄ… specyficzne sekwencje w DNA
-    zdolne do przecinania obu nici w czÄ…steczce DNA (hydroliza przez zarwanie dwóch wiÄ…zaÅ„ fosfodiestrowych)
-    znanych jest ponad 1000 restryktaz Nazewnictwo
-    wprowadzone w 1973 r przez Smith’a i Nathansa
-    na ogół 3-literowe skróty:
â€Ã³    pierwsza litera - skrót nazwy rodzaju bakterii,
â€Ã³    druga i trzecia - skrót nazwy gatunku,
â€Ã³    dodatkowa litera - szczep lub serotyp,
â€Ã³    rzymska liczba - numer kolejny enzymu z danego organizmu
-    np. HinAlll - Haemophilus influenzae, serotyp d, trzeci z kolei enzym uzyskany z tego gatunku i serotypu
Klasy restryktaz w zależności od mechanizmu działania, rodzaju substratów, produktów i kofaktorów Klasa I
-    aktywność in vitro zależy od ATP, Mg 2+ i S-adenozylometioniny
-    substratem jest dwuniciowy DNA
-    ciÄ™cie nieprecyzyjne, w pewnej odlegÅ‚oÅ›ci (nawet do 1000 nukleotydów) od rozpoznawanej nie zmetylowanej sekwencji
-    rozpoznawana sekwencja nie jest palindromowa; w Å›rodku sekwencji sÄ… dowolne zasady
-    zawieraj Ä… trzy typy różnych podj ednostek Klasa II
-    aktywność in vitro zależy od Mg2+ (nie wymagajÄ… dodatkowych noÅ›ników)
-    substratem jest dwuniciowy DNA
-    rozpoznaje sekwencje 4-, 6- i 8-nukleotydowe rozpoznawana sekwencja jest palindromowa
-    ciÄ™cie precyzyjne w obrÄ™bie rozpoznawanej sekwencji (lub w pobliżu - klasa IIS - shift) np. Mboll
-    zawierajÄ…jeden typ podjednostek (sÄ…homodimerami)
1