BIOLOGIA I GENETYKA
Replikacja: proces biosyntezy DNA, w wyniku którego z 1 cząsteczki DNA powstają 2 cząsteczki DNA identyczne z cząsteczką macierzystą
Semikonserwatywna: nowa cząsteczka DNA zawiera zawsze stary (macierzysty) łańcuch DNA, który jest matrycą dla nowo zsyntezowanej, komplementarnej nici DNA
Replisom - wsztskie elementy potrzebne do przeprowadzenia replikacji:
Polimeraza DNA
Helikaza
Białka SSB
Topoizomeraza
Primaza
Ligaza
Replikon - jednostka replikacji u bakterii obejmuje cały chromosom, a u eukariontów na chromosom przypada wiele repliko nów, bowiem proces replikacji rozpoczyna się w wielu miejscach (oczkach)
Etapy replikacji:
Inicjacja:
Rozplątanie nici przez helikazy i utworzenie „oczka replikacyjnego”
Powtórnemu skręcaniu się nici zapobiegają białka destabilizujące heliks (SSB)
Napięcia powstałe na nici są niwelowane przez topoizomerazy
Rozerwanie wiązań wodorowych między zasadami w heliksie DNA
Wiązanie białka inicjującego replikacje z sekwencją inicjującą na DNA
Synteza starterowego RNA (primera)
Prisom - zawiera tzw. Kompleks inicjujący primazy, białka rozpoczynające na DNA sekwencje inicjujące
Elongacja: wydłużanie się nowo powstałego łańcucha DNA poprzez komplementarne przyłączanie nukleotydów przy udziale POLIMERAZY DNA
Polimerazy DNA przyłączają nukleotydy tylko do końca 3'
Kierunek replikacji 5'3'
W miejscu rozpoczęcia syntezy nowej nici potrzebne jest krótki (5-10 nukleotydów ) odcinek RNA tzw. PRIMER
Primery syntetyzowane są przez polimerazę RNA, zależą od DNA (primerazy)
Primery zostają wycięte i zastąpione fragmentami DNA „przyklejanymi” do nici przez ligazy
Terminacja: zwijanie odbudowanej nici
PCR - łańcuchowa reakcja polimerazy - w warunkach laboratoryjnych można powielić DNA ( w termocyklerach)
Gen - jednostka informacji genetycznej, określony fragment DNA ( jednostka funkcji cistron) kodującemu aminokwasową sekwencję polipeptydu; odcinek DNA o określonej liniowej sekwencji nukleotydów, kodujący sekwencje AA w białkach. Geny są rozmieszczone w różnych miejscach chromosomów (są rozproszone) i porozdzielane nie kodującymi intergenowymi odcinkami DNA ( do 95% całego DNA)
Cistron - określa gen jako jednostkę funkcji odcinka DNA o długości kilku tysięcy pz, wyznaczający sekwencję AA jednego łańcucha polipeptydowego. Np. białka złożone z kilku podjednostek (diemryczne, tetrameryczne itd.) kodowane przez 2 lub więcej cistronów.
EKSPRESJA GENÓW
Polega na przepisaniu kodu genetycznego z DNA na mRNA (transkrypcja) a następnie na syntezie białka (transalcja), którego sekwencja aminokwasowa jest dyktowana poprzez sekwencję nukleotydów w DNA
Przepisywanie informacji genetycznej z DNA na mRNA transkrypcja
Przepisywanie sekwencji nukleotydów mRNA na sekwencje aminokwasów w białku translacja
Polimery nukleotydów zbudowane są z:
Rybozy - cukru
Reszty kwasu fosforowego
Zasad azotowych
Piramidowych
Cytozyna
Uracyl (zamiast tyminy)
Purynowych
Adenina
Guanina
Jednoniciowe (wyjątek tRNA)
Powstałe na matrycy DNA
Nie mają zdolności autoreplikacji
Rodzaje RNA:
mRNA - RNA matrycowy, RNA informacyjny
rRNA - RNA rybosomalny
tRNA - RNA transferowy, RNA transportowy
TRANSKRYPCJA:
Synteza mRNA na matrycy DNA przy udziale enzymów
Polimerazy DNA zależnej od DNA, dla której substratem są trifosfonukleotydy adeninowe, guaninowe, cytozy nowe, urocylowe, przyłączane do miejsca 3' pierścienia cukrowego
Kierunek 5'3'
Nie wymaga primerów do syntezy
Etapy transkrypcji:
Rozpoznanie przez białka kompleksu transkrypcyjnego na DNA miejsca startu
Komplementarne przyłączenie nukleotydów
Germinacja w miejscu STOP
W wyniku transkrypcji powstaje pre-mRNA, czyli cząsteczka powstała w wyniku całego genu, zarówno intronów i egzonów. Pre-mRNA posiada sekwencje kodujące i niekodujące, które zostały przepisane z DNA
Dojrzewanie pre-mRNA do mRNA następuje w jądrze komórki w wyniku:
Guanylacji (czapkowania) - przyłączenie do końca 5' metyloguanozynowy, która stabilizuje mRNA i uczestniczy w przyłączaniu Sue mRNA do rybosomów w trakcie translacji
Wycinania intronów (95%) i składanie egzonów (5%) splicing
Adenylacja - przyłączanie łańcucha Poli A do końca 3'
TRANSLACJA:
Biosynteza białka (proces zachodzący w cytoplazmie komórki). Translation - tłumaczenie, zakodowane informacje w postaci kodu genetycznego zapisanego na mRNA na sekwencję aminokwasów w białkach
Cząsteczki potrzebne do transkrypcji:
mRNA
tRNA
rybosomy (kompleks białek rRNA)
aminokwasy
enzymy
KOD GENETYCZNY
Cechy kodu genetycznego:
Trójkowy - tripled koduje 1 aminokwas
Zdegenerowany - kilka kodonów koduje jeden aminokwas 43 kombinacji, trójek nukleotydów 64 kodony 20 AA
Uniwersalny - u wszystkich organizmów jest taki sam
Niezachodzący
Bezprzecinkowy (synteza w sposób ciągły)
Kodon - trójka nukleotydów, który warunkuje przyłączenie określonego aminokwasu do łańcucha polipeptydowego
Antykodon - sekwencja 3 nukleotydów w cząsteczce tRNA komplementarna do kodonu dla określonego aminokwasu przenoszonego przez tRNA
tRNA :
kształt koniczynki, związany jest z funkcją modczytywanie kodonów na mRNA
posiada 3 pętle i 4 ramiona główne
ramię akceptorowe - przyłączenie AA przy udziale syntazy aminoacylo-tRNA
ramię antykodonowi
Rybosomy - wyspecjalizowane struktury służące do syntezy białek zbudowany z białek i rRNA
Każdy składa się z 2 podjednostek różniących się kształtem, składem chemicznym i funkcją.( podjednostka mała i duża)
Miejsca związane z transkrypcją w podjednostce większej:
A -akceptorowe, aminokwasowem aminoacylowe - przyłącza aminoacylo-tRNA, czyli tRNA z jednym AA
P - peptydowe - warunkuje przyłączenie się peptydylo-tRNA czyli tRNA z peptydem
Centralny dogmat biologii: informacja genetyczna zawsze jest przekazywana od DNA do RBA i dalej do białka
Transkrypcja translacja
Replikacja DNA mRNA białko
WYJĄTEK: ODWROTNA TRANSKRYPCJA!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
RETROWIRUSYw komórce żywiciela przepisują swój RNA przy udziale odwrotnej transkryptazy na DNA, który zostaje włączany do DNA gospodarza i następuje synteza białek wirusa
Odwrotna transkrypcja włączenie
RNA wirusa DNA wirusa do DNA gospodarza
Gen składa się z sekwencji:
Regulatorowej - PROMOTOR (nie ulega translacji)
Transkrybowanej - o strukturze kodowanego produktu
U eukariontów sekwencja transkrybowana ma charakter nieciągły. Złożona jest z intronów i egzonów