Temat ćwiczenia: Analiza i rozdział mieszaniny syntetycznych barwników organicznych	Data wykonania: 11.10.2007
		Data oddania sprawozdania 16.10.2007
	Imię i nazwisko: Agnieszka Rzepecka	Grupa: C1
		Ocena:

Opis wykonanych czynności:

1. Analiza jakościowa próbki metodą chromatografii cienkowarstwowej

1. Na płytce chromatograficznej zaznaczono linię startu i linię mety

2. Naniesiono 4 substancje wzorcowe i badany roztwór w następującej kolejności:

1. Czerwień metylowa

2. 1-fenyloazo-2-naftol

3. Badany roztwór

4. Oranż-2-naftolowy

5. Fluoresceina

3. Osuszono płytkę

4. Do komory chromatograficznej wyłożonej nawilżoną eluentem bibułą wlano eluenta (mieszanina toluenu z acetonem w stosunku objętościowym 3:1) na wysokość ok. 0,5cm

5. W komorze umieszczono płytkę

6. Rozwijanie chromatogramu zakończono, gdy czoło eluenta osiągnęło linię mety

7. Wyciągnięto płytkę i ołówkiem zaznaczono miejsca dotarcia plamek

2. Rozdział poszczególnych składników mieszaniny metodą chromatografii kolumnowej

1. Do kolumny chromatograficznej wlano kilka milimetrów toluenu

2. Na dno wprowadzono kłębek waty i zwilżono go toluenem

3. W zlewce przygotowano papkę z toluenu i tlenku krzemu SiO₂

4. Papkę wlano do kolumny i poczekano aż tlenek krzemu (adsorbent) opadnie

5. Spuszczono nadmiar rozpuszczalnika

6. Wsypano piasek na wysokość 1cm

7. Pipetką Pasteura wkroplono badaną próbkę

8. Otwierając kranik wlewano toluenu

9. Zebrano pierwszą frakcję - 1-fenyloazo-2-naftol

10. Zmieniono rozpuszczalnik na bardziej polarny- toluen i aceton wymieszane w stosunku objętościowym 3:1

11. Zebrano drugą frakcję -fluoresceinę

12. Zmieniono rozpuszczalnik na jeszcze bardziej polarny- etanol

13. Zebrano trzecią frakcję - oranż-2-naftolowy

14. Wysuszono zawartość kolumny pod zmniejszonym ciśnieniem i wysypano pozostałości

3. Potwierdzenie skuteczności rozdziału

1. Na płytce chromatograficznej zaznaczono linię startu i linię mety

2. Naniesiono 3 zebrane substancje

3. Osuszono płytkę

4. Do komory chromatograficznej wyłożonej nawilżoną eluentem bibułą wlano eluenta (mieszanina toluenu z acetonem w stosunku objętościowym 3:1) na wysokość ok. 0,5cm

5. W komorze umieszczono płytkę

6. Rozwijanie chromatogramu zakończono, gdy czoło eluenta osiągnęło linię mety

7. Wyciągnięto płytkę i ołówkiem zaznaczono miejsca dotarcia plamek

8. Potwierdzono czystość otrzymanych frakcji

Otrzymane podczas doświadczenia płytki i obliczanie współczynników opóźnienia:

Współczynnik opóźnienia dla czerwieni metylowej:

Współczynnik opóźnienia dla 1-fenyloazo-2-naftolu:

Współczynnik opóźnienia dla oranżu-2-naftolowego:

Współczynnik opóźnienia dla fluoresceiny:

Współczynnik opóźnienia dla 1-fenyloazo-2-naftolu:

Współczynnik opóźnienia dla oranżu-2-naftolowego:

Współczynnik opóźnienia dla fluoresceiny:

Identyfikacja plamek:

Otrzymana mieszanina barwników zawierała 1-fenyloazo-2-naftol, oranż-2-naftolowy oraz fluoresceinę.

Wnioski:

W chromatografii cienkowarstwowej w analizie jakościowej próbki najlepsze powinowactwo do nośnika miał 1-fenyloazo-2-naftol, natomiast najsłabsze oranż-2-naftolowy, który podczas rozwijania chromatogramu nie zmienił swojej pozycji. Wskazuje to na konieczność użycia bardziej polarnego rozpuszczalnika do wymycia go z linii startu. Potwierdzone to zostało w chromatografii kolumnowej, gdzie oranż wymywany był jedynie najbardziej polarnym z dostępnych rozpuszczalników - etanolem i został zebrany jako ostatnia frakcja. Kolejność wędrówki plamek w chromatografii cienkowarstwowej pokrywa się z kolejnością wymywania frakcji w chromatografii kolumnowej.

Rozdział mieszaniny okazał się skuteczny, co potwierdziła chromatografia cienkowarstwowa. Mimo iż współczynniki opóźnienia nie są jednakowe na obu płytkach, to potwierdziła się czystość otrzymanych związków. Współczynniki opóźnienia nie są równe dla danych substancji, ponieważ różne były warunki prowadzenia eksperymentu. Przede wszystkim komory chromatograficzne nie były w obu przypadkach tymi samymi, co prowadzi do różnic w wilgotności, wysyceniu parami rozpuszczalnika oraz w zmianach w proporcji toluenu i acetonu w fazie ruchomej.

---