fluorescencja


Numer ćwiczenia:

23

Temat ćwiczenia:

Wygaszanie fluorescencji.

Data wykonania doświadczenia: 16.12.08r.

Data oddania sprawozdania: 07.01.09r.

Grupa:

C2

Imię i nazwisko:

Katarzyna Sarnek

Nazwisko sprawdzającego:

dr A. Karewicz

Uwagi:

Ocena:

1. Cel doświadczenia:

Celem przeprowadzonego doświadczenia było wyznaczenie stałej wygaszania fluorescencji antracenu przez cząsteczki jodku potasu na podstawie pomiaru natężenia fluorescencji za pomocą spektrofotometru.

2. Przebieg doświadczenia:

Wykonanie:

● Sporządzono 100 cm3 0,5M roztworu KI w metanolu przez rozpuszczenie 8,30 g KI w kolbie na 100 cm3 i dopełnienie metanolem do kreski.

● Sporządzono po 10 cm3 roztworów antracenu o stężeniach: 1·10-4 oraz 5·10-6 mol/dm3 przez rozcieńczenie metanolem roztworu wyjściowego o stężeniu 5·10-4 mol/dm3.

● Następnie zarejestrowano widma absorpcyjne sporządzonych roztworów na spektrofotometrze UV - VIS używając metanolu jako roztworu odniesienia.

● Na podstawie zarejestrowanych widm absorpcyjnych wybrano długość fali światła wzbudzonego -  = 365 nm przy której dokonano pomiarów natężenia fluorescencji.

● Sporządzono po 10 cm3 roztworów o stałym stężeniu antracenu (5⋅10-5M)
i stężeniach KI równych: 0.01, 0.03, 0.05, 0.075, 0.10, 0.15, 0.20, 0.30, 0.40 M oraz roztwór o stężeniu antracenu 5⋅10-5M nie zawierający KI.

● Skalibrowano spektrofotometr ustawiając wskazówkę miernika na 0% dla czystego metanolu i 100% dla roztworu antracenu o stężeniu 5⋅10-5M nie zawierającego KI.

● Za pomocą spektrofotometru dokonano pomiarów natężenia fluorescencji dla pozostałych roztworów.

3. Zestawienie wyników:

Stężenie KI [mol/dm3]

Wskazanie miernika J [%]

0,000

100

0,010

79

0,030

61

0,050

52

0,075

44

0,100

39

0,150

27

0,200

20

0,300

17

0,400

12

4.Opracowanie wyników:

Przejścia elektronowe według notacji Clara i Platta.

Zaznaczono na zarejestrowanych widmach absorpcyjnych antracenu.

Rodzaj przejścia elektronowego

λ [nm]

Oznaczenie według notacji Platta

Oznaczenie według notacji Clara

S0→S2

251 nm

1Bb

β

S0→S1

375 nm

1La

p

Diagram Jabłońskiego

0x01 graphic

Energia stanów wzbudzonych

Skorzystano ze wzoru:0x01 graphic
, który wyprowadzono z 0x01 graphic
oraz 0x01 graphic

gdzie: h - stała Plancka =6,63·10-34[J·s]

c - prędkość światła = 3·108 [m/s]

λ - długość fali, dla której zaobserwowano przejście

λ=251 ·10-9m → E = 7,924 · 10-19 [J] = 4,953 [eV]

λ=323 ·10-9m → E = 6,158 · 10-19 [J] = 3,849 [eV]

λ=339 ·10-9m → E = 5,867 · 10-19 [J] = 3,667 [eV]

λ=356 ·10-9m → E = 5,587 · 10-19 [J] = 3,492 [eV]

λ=375 ·10-9m → E = 5,449 · 10-19 [J] = 3,406 [eV]

Stosunek J0/J.

Wartość J0/J obliczono korzystając ze wzoru: J°/J = 100/J

Wyniki obleczeń zestawiono w tabeli:

Stężenie KI [mol/dm3]

J0/J

0,000

1,00

0,010

1,27

0,030

1,64

0,050

1,92

0,075

2,27

0,100

2,56

0,150

3,70

0,200

5,00

0,300

5,88

0,400

8,33

Wykres zależności J0/J od stężenia substancji wygaszającej

0x01 graphic

Stała wygaszania fluorescencji przez cząsteczki KI

Skorzystano z równania Sterna - Volmera: 0x01 graphic
oraz przyjęto, że czas życia fluorescencji antracenu 0f = 0,6 ns , który to dany jest wzorem: 0x01 graphic

Po podstawieniu 0f do równania Sterna - Volmera otrzymujemy:

0x01 graphic

ponieważ stosunek J0/J jest równy 0x01 graphic
/ 0x01 graphic
, a zatem:

0x01 graphic

Po przekształceniu powyższego wzoru otrzymujemy wyrażenie na stałą szybkości wygaszania fluorescencji kq:

0x01 graphic

.

Na podstawie wzoru oraz wykresu zależności J0/J od stężenia substancji wygaszającej wyliczono, że

kq = 2,98 · 109 [ mol-1dm3s-1]

5. Dyskusja wyników:

W wyniku przeprowadzonego doświadczenia wyznaczono stałą wygaszania fluorescencji antracenu przez cząsteczki jodku potasu. Obliczona na podstawie doświadczenia stała nie jest wolna od błędów i prawdopodobnie różni się od tablicowej. Uzyskany wynik zawiera błędy które mogą wynikać z nieprecyzyjnego sporządzania roztworów bądź błędnego odczytu natężenia fluorescencji.

Na podstawie zarejestrowanych widm absorpcyjnych określono długości fali odpowiadające maksimom, a następnie z tych danych obliczono różnice energii pomiędzy poziomem S0 a kolejnymi poziomami oscylacyjnymi stanu S1. Z obliczonych wyników wykreślono schematycznie diagram Jabłońskiego.



Wyszukiwarka

Podobne podstrony:
Fluorescencja chlorofilu
ćw nr 2 badanie lamp fluorescencyjnych (2)
Techniki Fluorescencji w Analizie instrumentalnej, Analityka medyczna, Analiza instrumentalna
Sodu fluorek cz
Cyny (II) fluorek
Fluorescencja
Wapnia fluorek
Amonu fluorek r r@
Potasu fluorek?zwodny
Magnezu fluorek (2)
FIZLAB, J B 6, absorbcja i fluorescencja
fluorescencja
pomiary wielkości fotometrycznych lamp fluore
Fluoresceina
Baru fluorek cz
Amonu fluorek cz
Fluorescent proteins as a toolkit for in vivo imaging 2005 Trends in Biotechnology
39 Istota fluorescencji i fosforescencji
Pomiary wielkości fotometrycznych lamp fluorescencyjnych z wykorzystaniem walca fotometrycznego 0001

więcej podobnych podstron