Podstawy hodowli komórkowych

Agnieszka Piastowska-Ciesielska

3 pkt ECTS

1. Opisz zasadę metody testu MTT.

2. Oblicz liczbę żywych komórek wiedząc, że z zawiesiny komórek o objętości 4 ml pobrano 20µl, które następnie połączono z 20µl błękitu trypanu, następnie 10 µl tej mieszaniny naniesiono na komorę z siatką Neumana i zliczono:

• w 1 obszarze zliczona 23 żywe komórki 4 martwe

• w 2 obszarze zliczona 21 żywe komórki 5 martwe

• w 3 obszarze zliczona 19 żywe komórki1 martwe

• w 4 obszarze zliczona 27 żywe komórki 4 martwe

• w 5 obszarze zliczona 28 żywe komórki 2 martwe

1. Dlaczego DMSO jest używane do przygotowania pożywki, w której zostaną zamrożone komórki?

2. O czym świadczy zmiana koloru pożywki (zawierającej czerwień fenolową) na kolor żółty?

3. Wymień i scharakteryzuj białka adhezyjne komórek ssaczych.

4. Opisz zasadę metody wykorzystywaną w barwieniu DAPI.

5. Narysuj i opisz fazy wzrostu ludzkich komórek nowotworowych w warunkach in vitro.

6. Opisz zasadę metody oznaczania zawartości białka metodą Bradford.

7. Co oznaczają następujące skróty: FBS, HS, NBCS.

8. Podaj cztery przykłady surowic wykorzystywanych w hodowlach komórkowych.

9. Dlaczego surowice zwierzęce wykorzystywane w hodowlach komórkowych są inaktywowane termicznie?

10. Wymień i scharakteryzuj metody sterylizacji wykorzystywane w pracowni hodowli komórkowych.

11. Wymień i scharakteryzuj rodzaje hodowli komórkowych ze względu na typ wzrostu komórek.

12. Jaka jest różnica pomiędzy testem WST-1 a BrdU?

13. Trypsyna i EDTA co je kłaczy i do czego można je wykorzystywać pracując z hodowlami komórkowymi.