Etapy mikrorozmnażania:
0. Dobór materiału roślinnego
1. Założenie czystej (aksenicznej) kultury
2. Masowe namnażanie
3. Przygotowanie roś do warunków
normalnych (ex vitro)
- wydłużanie
- ukorzenianie
- (ewentualne wstępne hartowanie)
4. Przesadzenie roślin do gleby, hartowanie
TYPY MIKRO.:
1.hodowle wierzchołków pędów;
jest to forma wzrostu uorganizowanego
- wierzchołki pędów rosną, ukorzeniają się,
po czym zostają adaptowane do warunków
ex vitro i wykorzystane jako sadzonki);
2. pobudzenie rozwoju pąków bocznych
w hodowlach odcinków pędów
3. powstawanie pąków przybyszowych
bezpośrednio w tkankach eksplantatu
4. powstawanie pąków przybyszowych
z kom kalusa - organogeneza pędowa pośrednia
5. bezpośrednia somatyczna embriogeneza
6. somatyczna embriogeneza pośrednia
(wada: częsta niestabilność genetyczna kom kalusa)
-SPRZĘT /*Materiał
- autoklawowanie,
-* r-rze podchlorynu Na/Ca, chloramina (uwalnia Cl)
- alkohol (denaturacja)
- opalenie nad palnikiem
- sucha sterylizacja (wys.temp.w suchym powietrzu)
* uwalniające tlen (wodę utlenioną),
* woda bromowa, chlorek rtęci, antybiotyki.
1. Umycie materiału
2. Wyciąć tkanki zamierające
3. Moczenie w min. 70% etanolu
4. + detergentu
5. + antybiotyki/PPM do podłoża.
6. Płukanie jałową wodą destylowaną
7. Cięcie prepar. i na pożywkę…
_______________
Woda, Makro-, Mikro-, źródło C (sach),
Wit., aminokw., hormony roś,
skł.org (mlek.kokos), subst.zespalaj.(agar)
MS (KNO3, KH2PO4, NH4NO3,
MgSO4*7H20, CaCl2*2H20, FeNaEDTA,
Mikroel., m-Inozytol, kw.nikotynowy,
tiamina, pirydoksyna,
glicyna, sach. (5,6-5,8pH)