Liczenie drobnoustrojów Mikroflory wody, powietrza i opakowań

Normy co ustajają

-w jaki sposób pobierać próbki

-jak przeprowadzać analizę

-na jakich podłożach analizować

Próbka powinna reprezentować całość mikroorganizmów są ułożone w sposób nieregularny

Błędy

-10-15%labolatoria

-3-5% badania

Liczba drobnoustrojów jest podawana w 1g lub 1 cm³

Metody liczenia drobnoustrojów

-bezpośrednie liczenie

-pośrednie liczenie

-wskażnikowe

Bezpośrednie liczenie(liczenie bezpośrednie w komorach )

-thoma

-homada

-purkera

-Fuch Rosenthala

Wzór na liczbe bezpośrednią drobnoustrojów

L=4*10⁶*a *n

n-rozcieńczenie

a-liczba drobnoustrojów

Pośrednie (w tej metodzie liczymy kolonie a nie drobnoustroje)

-metoda rozcieńczeń -w 1cm³ musi się znajdować 1 komórka

-metoda płytkowa –do izolowania czystych kultur

-w jednym płytce petriego musi być od 30-300 koloni takie najłatwiej się liczy

-posiew na płytki ( jeżeli jest probówką którą wysiewamy musimy zrobić próby ślepe 1 w tył i w przód)

-wzór

L=(R²/r²)*a*n

R-promień płytki

r-promień pola widzenia

a-średnia liczba kolonii

n-rozcieńczenia

metody wskaźnikowe

-szybkie metody informujące o ogólnym stopniu zakażenia środowiska i aktywności mikroflory

-wskazniki

+miano coli

+bacillus mesentericus

+miano enterokoków

+wykrywanie beztlenowców

Rozbieżności w liczeniu

-metodzie mikroskopowej liczy się wszystkie komórki łańcuszki dwoinkach na płytce wyrasta jako jedna kolonia

-metoda hodowlana nie uwzględnia martwych komórek i wyrastają tylko komórki które odpowiada podłoże

Mikrobiologia wody

Od czego zależy

-przyrody

-klimatu

-meteorologii

-rodzaj dna

-pory roku

-pory doby

Drobnoustroje w wodzie

-autochtoniczne(tubylcze)

+autotroficzne

+fototroficzne

+chemosyntezujące

-allochtonicze(naniesione)

+z powietrza i gleby

+od ludzi i zwierząt

Drobnoustroje podział na szkodliwość

-patogenne

-saprofityczne

-szkodliwe w określonych gałęziach

Patogenne

-Vibro cholenae

-Salmonella typhi

-shigella flexneri

-brucelloza

-gorączka błotna

Miano coli

-metoda pośrednia wykrywania patogenów

-miano coli jest to najmniejsza ilość wody wyrażona w gramach lub cm³ w której stwierdzono obecność pałeczek okrężnicy

Woda powninna mieć miano nie mniejsze niż 100

Liczba bakterii na agarze odżywczym po 24h w temperaturze 37^oC nie większa niż 20

Mikroflora powietrza

-nie jest sprzyjające

-najmniej mikroorganizmów grudzień styczeń

-najwięcej czerwiec sierpień

-najmniej zakażone jest powietrze nad lasami górami polami

-najwięcej w miastach

-najczystsze powietrze po deszczu

-liczenie mikroflory 5 minut z podłożem bez zawirowań powietrza (100cm²płytka pozwala zbacać 10dm³)

-wyjałąwianie powietrza UV

Mikroflora opakowań

-w celu usunięcia zanieczyszczeń opakowania poddawane jest myciu co także usuwa mikroflorę

-Efektywność mycia

X=(B*100)/A Y= 100-(B/A)*100%

1. Przed myciem

2. Po myciu

Dobre mycie usuwa 99,9 % bakterii

Metody określania mikroflory opakowań (hodowlane)

-metoda popłuczyn –szklane metalowe, płyn Ringera 50cm³ na litrową butelkę (25 razy obrotów w poprzek i wzdłuż) wysiewane prosto na płytkę

-metoda bezpośrednia-wylewa się do butelki podłoże które równomiernie się obraca butelkę inkubuje

-metoda tamponowa- specjalny przygotowany jałowy tampon maczany jest w płynie Ringera (powierzchnia tamponu jest równa płynowi ringera) odciska na tamponie wrzuca się z powrotem do kolby wstrząsa przez 2 minuty robimy 3 próby rozcieńczamy

-metoda odciskowa-wlewamy podłoże suszymy opakowanie które badamy musimy wyciąć 5cm² i odciskać na podłożu wszystko jałowym sprzętem (robimy 3 równoległe płytki)