Enzymy restrykcyjne

• występują u sinic i bakterii

• rozpoznają i przecinają obce nukleotydowe sekwencje

• chronią przed obcymi cząsteczkami DNA wirusów

• jednocześnie wytwarzane są metylazy modyfikujące te same własne sekwencje tak aby nie były trawione

Enzymy restrykcyjne

• Rozpoznawane sekwencje mają najczęściej charakter palindromowy tj. odczytywane z kierunku 5’3’ są identyczne

• Przecinanie wiązań fosfodiestrowych obu nici zachodzi dla tej samej pary lub z przesunięciem jednego lub kilku nukleotydów

Enzymy restrykcyjne klasy II

• rozpoznają 4, 6 rzadziej 8 nukleotydowe sekwencje

• miejsce przecięcia znajduje się w obrębie rozpoznawanej sekwencji lub w ściśle określonej odległości od niej

• nazwa pochodzi od gatunku i szczepu bakterii z której izolowany jest dany enzym

np. Escherichia coli szczep R Eco RI

Zamiana, delecja lub insercja jednej lub kilku par zasad może spowodować brak lub nowe miejsce cięcia dla enzymów

RFLP (Restriction Fragments Length Polymorphism )

• Polimorfizm długości fragmentów restrykcyjnych

• Różnicowanie organizmów

• Badanie pokrewieństwa

• Różnica długości fragmentów DNA pociętych enzymami restrykcyjnymi