Zadanie nr 1: Oznaczanie genotypów na podłożach selekcyjnych

Używając mikromanipulatora można rozdzielić askospory pochodzące z jednej tetrady. Uzyskuje się w ten sposób haploidy będące produktem mejozy jednej komórki diploidalnej. Podczas tworzenia spor większość genów segreguje do komórk potomnych wg. praw genetyki mendlowskiej. Heterozygotyczny marker będzie segregował zgodnie z wzorcem 2:2. W ten sposób można otrzymać szczepy o nowej kombinacji cech.

Doświadczenie ma na celu określenie genotypów askospor powstałych w wyniku sporulacji diploidalnego szczepu drożdży, hetoryzygotycznego w każdym locus markerów troficznych oraz określenie, czy askospory rzeczywiście pochodzą z jednej tetrady.

Materiały:

- szalka z wyrośniętymi koloniami powstałymi w wyniku rozłożenia za pomocą mikromanipulatora nadtrawionych tetrad na pełnym bulionowym podłożu YPD

- szalki z wykonanymi replikami na podłożach selekcyjnych (Sc-….)

Procedura:

Na podstawie wyników wzrostu kolonii odbitych na szalkach testowych określ genotypy poszczególnych kolonii wyrosłych z pojedynczych askospor i na tej podstawie zdecyduj czy dana tetrada jest tetradą prawdziwą czy fałszywą.

Podaj genotyp diploida: ………………………………….

Podaj genotyp haploidalnych kolonii wyrosłych z askospor

tetrada nr 1 tetrada nr 2

1. 1.

2. 2.

3. 3.

4. 4.

prawdziwa/fałszywa prawdziwa/fałszywa

dlaczego?

tetrada nr 3 tetrada nr 4

1. 1.

2. 2.

3. 3.

4. 4.

prawdziwa/fałszywa prawdziwa/fałszywa

---