Mechanizmy odporności przeciwwirusowej
We wczesnym okresie zakażenia wirusami przed rozprzestrzenianiem się wirusa stanowią mechanizmy odporności nieswoistej. Tuż po zakażeniu komórka rozpoczyna wydzielanie interferonu (hamuje on replikację wirusa i chroni sąsiednie komórki przed zakażeniem). Synteza interferonu prowadzi do wzrostu aktywności kom NK. We wczesnej fazie zakażęnia na błonie komórkowej dochodzi do ekspresji antygenu wirusa. Te antygeny rozpoznają kom NK przeciw wirusom. Działanie układu dopełniacza sprowadza się do wspomagania swoistych przeciwciał. Makrofagi powodują lizę i fagcytują zakażoną komórkę. Powstanie odpowiednich limfocytów T wymaga prezentacji antygenów wirusowych w połączeniu z cząsteczką MHCklasy I i lub II. limfocyty T cytotoksyczne - odpowiadają na antygen związany z cząst mmci klasy. Limf pomocnicze rozpoznają enzymy związane z MHC kl II. Na pow kom prezentujących Ag. Przy zakażeniach wirusami większość białek produkowanych w cytoplazmie i prezentowanych na powierzchni komórki stanowią peptydy wirusa. Cząsteczki MHC kl I znajdują się na większości komórek organizmu. Skłąd większości kom zakażonych wirusem może być wyeliminowana przez lim T cytotoksyczne. Aktywowane limfocyty T pomocnicze uwalniają INF ᴕ i IL-2stymulacji ona limfocyty CD8 i kom NK w czasie zakarzenia wirusem wyróżniamy fazy :
-adsorpcjacja wirusa
-wnikanie wirusa kapsyd odpada.
kom układu immunologicznego Jakie są metody badania In vitro aktywności
Oceniana poziomu Ab skierowanych przeciwko Ag
Serologiczna : odczyn aglutynacji , precypitacji, neutralizacji
Elisa
Elispot
Ocena aktywności kom zaangażowanych w odpowiedzi immunologicznej (T, B , NK, Dc, Mg)
Aktywność proliferacyjna Th
Aktywność cytotoksyczna
Wytwarzanie cytokinin
Elispot
Elisa
RT-PCR
3. w jaki sposób sprawowany jest nadzór immunologiczny
Nadzór immunologiczny bierze udział w rozpoznawaniu i niszczeniu kom nowotworowych biorą w nim udział mechanizmy /komórki:
Cytotoksyczność za pośrednictwem przeciwciał (ADCC)
Dopełniacz - liza kom opłaszonych przeicwiałami
Cytotoksyczne limf T rozpoznające Ag nowotworowe
Limf T i NK uwalniają IFN ᴕ co aktywuje makrofagi 0 cytotoksyczne wobec kom nowotworowych
Komórki NK - spontanicznie cytotoksyczne, rozpoznają kom nowotworowe przez MHC kl I zabijają na drodze perf za pośrednictwem Tn alfa i TNFbeta, także i z udziałem dopełniacza
Pierwotna i wtórna odpowiedz immunologiczna
Odpowiedź pierwotna występuje w ciągu 4-5 dni po wprowadzeniu do organizmu antygenu, z którym wcześniej się on nie zetknął. Odpowiedź pierwotną zapoćżatkowuje wytwarzanie przeciwciał IgM a następnie bardziej specyficznych i skuteczniejszych IgG. Wytworzone przeciwciała reagują z antygenami tworząc kompleksy lub precypitaty które są eliminowane przez komórki żerne. Komórki plazmatyczne wytwarzają przeciwciała przez okres 3-4 dni. Jeśli ilość Ag wprowadzona początkowo do organizmu jest wystarczająco duża to antygenowo swoiste limf B mogą ponownie być stymulowane a zmniejszenie powstanie więcej komórek plazmatycznych i zwiększa się wytwarzanie przeciwciał. Jeżeli natomiast Ag zostanie wyeliminowany to spada poziom swoistych przeciwciał. Odpowiedz wtorna następuje przy ponownym pwrowadzeniu tutego samego Ag do organizmu. Liczba odpowiadających limf B będzie większa w porównaniu z pierwszym kontaktem z antygenem , ponadto po pierwszym kontakcie powstały limfocyty pamięci (stoiste dla danego antygenu) odpowiedź wtórna związana z pamięcią charakteryzuje się krótszą fazą utajenia przed pojawieniem się wysokiego poziomu przeciwciał w surowicy. Wiąże się to z większą liczbą kom. Plazmatycznych wytwarzających więcej przeciwciał przedewszystkim klasy IgG.
Odpowiedz przeciwnowotworowa:
Do najważniejszych mechanizmów immunologicznych przeciwstawiających się rozwojowi nowotworu należą: aktywność komórek NK, cytototoksyczność pobudzonych makrofagów neutrofilów, cytotoksyczność komórkowa zależna od przeciwciał, cytotoksyczność przeciwciał zależna od dopełniacza, aktywność cytikin wydzielanych przez limf Ti makrofagi. Ważnym elementem odpowiedzi komórkowej są swoiste limf Th rozpoznają one antygeny związane z nowotworem prezentowane w połączeniu z MHC kl II. W wyniku aktywacji wydzielają one cytokiny, któ®e wspomagają i akumulują kolejne komórki układu odpornościowego tu bezpośrednio niszczą komórki nowotworowe hamują , także ich proliferacje (dzięki TNF i immunotoksynom). Cytokinina aktywuje makrofagi (pobudza je do zabijania kom nowotworowych lub lhamowania ich proliferacji). Cytokiny takie jak Il-12 Il -15 Il-18 aktywuje limf Tc i kom NK. Chemokiny wydzielane przez makrofagi przyciągają chemotaktycznie wiele komórek - neutrofile, monocyty, limfocyty. Niektóre chemokiny Ip10 hamują rozwój naczyń krwionośnych w obrębie nowotworu (ale niektóre mogą je stymulować) same kom nowotworowe mogą wydzielać czynniki chemotaktyczne dla monocytów i makrofagów przyśpieszajace ich powstawanie i aktywujące je. Odp typu humoralnego możerównież prowadzic do zabicia kom nowotworowych w skutek związana odpowiedniego przeciwciała z TAA (antygenem związanym z nowotworem) na kom nowotworowej i aktywacji dopełniacza lub przyłączenia komórki K.
Odporność bierna - uzyskiwana jest bez bezpośredniego kontaktu z antygenem) może być naturalna - od matki lub sztuczna z surowicy odpornościowej) . odporność beirna sztuczna : osobnik zyskuje ją po podaniu surowicy odpornościowej w sytuacji bezpośredniego zagrożenia. Surowice mogą być homologiczne od tego samego gatunku heterologiczne od innego gat zwierzęcia. Różny jest czas przebywania w organizmie biorcy przeciwciała. Po podaniu surowicy homologicznej odporność może utrzymywać się pare tyg a po heterologicznej nie przekracza 2 tyg. Odporność bierna naturalna już w życiu płodowym przez łożysko transpotowane są wszystkie klasy IgG. Za ten proces opowiadają receptory dla fragmentu Fc Ich w końcu ciąży poziom immunoglobulin IhG u płodu osiąga wyższy poziom niż u matki, ktaże już w okresie płodowym pojawiają się IgM. Po urodzeniu IgM i IgG obecne są w siarze a potem w mleku tu w mniejszym stężeniu. Chronią one układ pokarmowy oddechowy noworodka. Prócz nich znajdują się tez makrofagi limfocyty cytokiny i inne. Siara musi być podana w czasie pierwszej doby po porodzie. Przeciwciała IgG przechodzą z jelit przez nabłonek do krwi (receptory dla dla fragmentu Fc cząsteczek immunoglobuliny IgG) jeśli później podany siarę w układzie pokarmowym będą już enzymy które rozłożą białka Ig. IgA przechodzące z mlekiem i siarą matki zabezpieczaja blony śluzowe układu pokarmowego noworodka.
Rodzaje szczepionek:
Szczepionka to produkt pocodzenia biologicznego zawierający substancje zdolne do indukcji określonych procesów immunologicznych warunkujących powstanie trwałej odporności bez działania toksycznych. Wytworzenie szczepionki polega na związanie właściowsci drobnoustroju lub jego produktów na nietoksyczny ale dalej immunogenny (proces ten nazywamy atenuacja). Wyróżniamy szczepionki
Swoiste indukują trwałą i specyficzną odpowiedź na określony drobnoustrój są monowalentne - jeden gatunek lub typ poliwalentne kilka serotypów tego samego gat (np. przeciw grypie) swoiste skojarzone zawierają antygeny kilku drobnoustrojów w jednej strzykawce. Szczepionki swoiste dzielimy na 4 grupy:
Zwierające żywe drobnoustroje o zmodyfikowanych właściwościach
Zawierające martwe drobnoustroje inaktywowane chemicznie , termicznie
Oczyszczone produkty drobnoustrojów np. antygeny powierzchniowe , inaktywowane toksyny
Zawierające produkty rekombinowanego DNA uważane za najbezpieczniejsze
Nieswoiste mieszaniny zabitych drobnoustrojów lub ich lizaty, zwykle stosowane jako niespecyficzne stymulatory odporności w zakażeniach nawracających lub przewlekłych zakażeniach. Podawane doustnie donosowo podskórnie domięśniowo. Ich stosowanie budzi kontrowersje gdyż zawierają mieszaninę białek bakteryjnych może to stwarzać działania niepożądane. Wyróżniamy także szczepionki wektorowe - atntenulowany drobnoustroj którego genom wprowadzono do inego drobnoustroju. Wprowadzony do org , tam prezentacja białka kogowanego przez gen wprowadzony. Szczepionki eliotypowe wykorzystują przeciwciała monoklinalne do wytwarzania przeciwciał antyidiotpowych o działaniu odwrotnym ( stosowane np. przeciw endotoksynom)
Cytokiny angiogenne w rozwoju nowotworu
Angiogeneza to proces powstawania nowych naczyń krwionośnych. Główną rolą odgrywają tu cytokiny proangiogenne na 2 sposoby.
Bezpośrednie oddziaływanie na kom śródbłonka pochłaniające ich prolitferacyjne migracje . aktywność różnicowanie należą tu np. VEGF , IL-8 ich źródłem sąkom nowotworowe
Przez indukcję uwolnianie cytokiny angiogenne przez różne typy kom np. EgF, IgF, Il-1 , Il -6, Il-8 ThF , TnF alfa nawet przy obecności czynników hamujących proces angiogenezy nowotworu.
Przyczyny ignorowania przez limfocyty komórek nowotworowych:
Komórki nowotworowe wytworzyły wiele mechanizmów powodujących osłabienie działania odpowiedzi immunologicznej. Wiele z nich utrudnia działanie limfocytom. Komórki nowotworowe są poddawane selekcji immunologicznej. Przetrwają ją tylko te kom nowot które są najmniej wrażliwe na działąnie układu odpornościowego ) często na kom now jest zmniejszona ekspresja cząsteczek MHC , które prezentują antygeny limfocytom T. zaobserwowano także czasowe zmniejszenie się antygenowości kom nowotworowych. Uwalniają one także do środowiska antygeny związane z błonami mogą one blokować limfocyty. (np. utrata zdolności, zabijania kom now przez swoiste lif T cytotoksyczne w obecnośći wolnych antygenów). Limfocyty mogą ignorować antygeny kom now gdyż organizm styka się ze stopniowo wzrastającymi ich stężeniami (zjawisko odczulania). Wiązanie przeciwciał nieaktywujących dopełniacza i antygenami kom nowotworowych blokują do nich dostęp np. cytotoksycznych limf T. komórki nowotworowe blokują działanie limfocytów także poprzez wydzielanie rozpuszczapnych czastek adhezyjnych np. ICAM-1 . immunosupresyjne działanie także czynniki wydzielane przez komórki nowotworowe jak TGF-beta czy IL-10. niektóre komórki nowotworowe dokonują ekspresji białko FAS na swojej powierzchni co powoduje apoptozę przylegających do nich limfocytów T.
EIA - na czym polega
EIA odczyny immunoenzymatyczne - test ELISA. Możemy stosować do oznaczenia poziomu Ab skierowanych przeciwko AGX. Oceny aktywności komórek zaangażowanych w odpowiedz immunologiczną(wytwarzanie cytikin) pozwala wykrywać Ag i określić ilość Ag i Ab. Test ELISA -tekst kanapkowy, substratem wydzieliny kawałki tkanki, mocz, test rozpoczynamy od przyłączania Ab do płytki , spłukaniu nie przyłączonych Ab, następnie dodajemy materiał badany z Ag (inkubujemy) Ag i Ab łączą się , usuwamy nadmiar Ag płuczemy przeciwciałami z enzymem (wyznakowanie) nastpenie dodajemy substratu by zaszła reakcja barwna w próbcie jakościowej - zmiana barwy w próbie.ilościowej więcej enzymu wiecej Ag i gdy brak antygenu brak reakcji barwnej. Gdy szukamy przeciwciał materiałem badanym surowica i wyznakowane są tu antygeny i na płytkę nanosimy surowicę z … przeciwciałami, następnie dodajemy Ag wocec których szukamy przeciwciał inkubujemy, płuczemy gdy szukanie przeciwciała zawodzi reakcja po dodaniu substratu zmiana barwy. Możemy przeprowadzic test pośredni przeciwciała drugorzędowe są znakowane i na płytkę przyczepiamy Ag i nas™epnie dodajemy surowicę , inkubacja, następne przeciwciała drugorzędowe znakowane, łączy się z przeciwciałami przyłączonymi do Ag, substrat i barwienie, gdyby brak przeciwciał, przeciwciała drugorzędowe zonakowane nie pasują do Ag są one wypłukiwane. Można przeprowadzić test …..szukamy Ag. Płytka z przeciwciałami monoklinalnymi nieoznakowane, dodajemy mat badany inkubujemy i płuczemy . dodajemy znakowany Ag inkubacja przeciwciał które nie złały. Ag teraz go łapią. Dodajemy substrat. Jeżeli nastąpi zmiana barwy to oznacza to ze im słabsza barwa tym większe stężenia Ag w badanym materiale. Gdy brak Ag w materiale to barwa będzie intensywna i przyłączaja się tylko znakowane przeciwciała - wszystkie miejsca wolne.
?????? --_--`
Odczyny immunofluorescencji - odczyny znakowane fluorochromami (IFA) . fluorochromy po dwpływem UV zostają naświetlone i emitują światło . przyczepione do Fc przeciwciała. Materiałem może być wszystko najczęściej preparaty tniemy na małe kawałki i na szkło.
Immunofluorescencja pośrednia gdy szukamy np. receptora powierzchniowych i najpierw przeciwciało a potem antygen a potem dodajemy znakowane przeciwciało skierowane
Mechanizmy odpowiedzi nieswoistej
Odpowiedz nieswoista - bardzo stara filogenetycznie wrodzona, przebiega tak samo niezależnie od czynnika wywołującego, uwarunkowana genetycznie - związana z określonym gatunkiem , rasą, działa na poziomie żywego organizmu , uruchamiana w sytuacji zagrożenia
Nieswoiste mechanizmy obronne:
Bariery skóra włosy rogowaciejący naskórek wydzieliny gruczołów , błona śluzowa pot łzy sok żołądkowy
Czyniki humoralne - krew płyny ustrojowe
Czynniki komórkowe - kom żerne fagocyty
Gorączka zapalenie
Drobnoustroje wchodzą w skład niesoistych mechanizmów obrony jako naturalna mikroflora