Nazwisko i imię: Symbol podgrupy: 1B
Budzyńska Małgorzata Daty wykonywania ćwiczenia:
Kosmowski Łukasz 16 i 23. 10.2007
Osoba prowadząca ćwiczenia: mgr inż. Tomasz Czernecki
Temat i numer ćwiczenia:
Zimne zacieranie pszenicy i oznaczanie wydajności fermentacyjnej (ćwiczenie nr 1)
Cel ćwiczenia
Oznaczenie wydajności etanolu z surowców skrobiowych (mąka pszenna) przeprowadzone metodą biologiczną.
Zadania do realizacji
Oznaczenie zawartości skrobi w substracie
Przygotowanie hydrolizatu surowca skrobiowego (hydroliza kwasowa, enzymatyczna)
Fermentacja etanolowa hydrolizatu skrobiowego
Wydzielenie etanolu z produktów metodą destylacji prostej
Oznaczenie etanolu za pomocą refraktometru zanurzeniowego
Wprowadzone zmiany w metodykach
Przygotowanie próby fermentacyjnej do zimnego zacierania pszenicy - użycie kompleksu enzymatycznego α-amylazy i glukoamylazy zamiast pojedynczych preparatów enzymatycznych.
Przygotowanie hydrolizatu z mąki pszennej do oznaczenia wydajności fermentacyjnej - ustalenie pH próby przez autoklawowaniem.
Spostrzeżenia i obliczenia
Próba z hydrolizą kwasową - słaby wzrost drożdży i brak zapachu etanolu.
Próba z hydrolizą enzymatyczną - zmiana barwy hodowli przed i po inkubacji, wyczuwalny zapach etanolu.
Obliczenia
Zawartość skrobi w mące użytej do ćwiczenia:
=
= 0,5246 [g]
C - ilość gramów skroi w 100ml badanego roztworu
l - długość rurki polarymetrycznej w dm
a - odczyt z sacharymetru pomnożony przez 0,346 w celu wyrażenia go w stopniach kątowych
- skręcalność właściwa skrobi w 1,124% w roztworze HCl
% (m/v) alkoholu:
1) destylat po hydrolizie enzymatycznej:
30oR - pomiar refraktometrem zanurzeniowym
Vol% = 10,82%
m/v = 8,59g/100cm3
2) destylat po hydrolizie kwasowej:
14oR - pomiar refraktometrem zanurzeniowym
Vol% = 0,00%
m/v = 0,00g/100cm3
Objętość obu uzyskanych destylatów:
V1) = 20 cm3
V2) = 20 cm3
Maksymalna teoretyczna wydajność [g] jaką można uzyskać z użytej naważki mąki:
Ad. 1) 5g mąki - 0,5246g skrobi
35g mąki - x g skrobi
100 000 g skrobi - 71540 ml etanolu
3,6722g skrobi - x ml etanolu
ms = ρ*V = 0,7893 * 2,6271 = 2,0735[g]
Ad. 2) 5g mąki - 0,5246g skrobi
25g mąki - x g skrobi
100 000g skrobi - 71540 ml etanolu
2,6230g skrobi - x ml etanolu
ms = ρ*V = 0,7893 * 1,8765 = 1,4811[g]
Praktyczna wydajność [g] jaką uzyskano z użytej naważki mąki:
Ad. 1) 2,0735g - 100%
x - 92%
Ad.2) 1,4811g - 100%
x - 92%
Procentowa praktyczna wydajność jaką uzyskano:
Wp =
(etanolu)
Wt =
1,9077g - 100%
1,7180g - x
Wp(%) =
Wnioski
♦ Procentowa praktyczna wydajność etanolu z mąki pszennej poddanej hydrolizie enzymatycznej wyniosła 90,056%.
♦ Procentowa praktyczna wydajność etanolu z mąki pszennej poddanej hydrolizie kwasowej jest niemożliwa do obliczenia z powodu braku etanolu w uzyskanym destylacie.
Analiza błędu:
W próbie, która była poddana hydrolizie kwasowej nie stwierdzono zawartości etanolu (pomiar refraktometrem zanurzeniowym 14oR oznacza 0,0% - odczyt z tablic). Prawdopodobne przyczyny braku etanolu w próbie to:
- Słaby wzrost drożdży gorzelniczych, a tym samym niski stopień fermentacji etanolowej.
- Burzenie się roztworu hodowlanego poddawanego destylacji prostej i związane z tym niepotrzebne otworzenie kolby destylacyjnej - prawdopodobne wyparowanie alkoholu do otoczenia.
3