1. WYZNACZANIE STAŁEJ MICHAELISA I SZYBKOŚCI MAKSYMALNEJ DLA DEHYDROGENAZY L-MLECZANOWEJ
Sprawozdanie, wersja elektroniczna
Proszę nie kasować wprowadzonego tekstu i tabel, a jedynie uzupełnić sprawozdanie według podanych wskazówek. Proszę zmodyfikować nazwę pliku poprzez zastąpienie n - nazwiskami
Oceny - wykonanie: opis:
Ćwiczenie wykonane przez (nazwiska, e-mail)
I. Wyznaczenie parametrów kinetycznych dla dehydrogenazy mleczanowej
Integralną częścią sprawozdania jest załączony plik arkusza obliczeniowego (Exel) o nazwie 2010_KIN1_n.xls i 2010_KIN2_n.xls (n- nazwiska studentów)
Arkusze kalkulacyjne zostały przygotowane przez prowadzących i umożliwiają wyliczenia stałych kinetycznych na podstawie pomiarów szybkości początkowych wyznaczonych przy różnych stężeniach substratu (2010_KIN1_n) oraz przebiegu krzywej progresji (2010_KIN2_n)
Otrzymane w arkuszu kalkulacyjnym wyniki należy wpisać do kolejnych tabel
Stężenie substratu [mM] |
Szybkości początkowe |
||
|
Wartości średnie μmol min-1 |
Błędy wyznaczania szybkości reakcji |
Maksymalny błąd pomiaru zmian absorbancji |
0,01 |
|
|
|
0,02 |
|
|
|
0,05 |
|
|
|
0,075 |
|
|
|
0,1 |
|
|
|
0,2 |
|
|
|
0,3 |
|
|
|
Stałe kinetyczne |
Wartości |
Błędy wyznaczania* |
|
Metoda wyznaczenia wartości kinetycznych |
|
|
Bezpośrednio z hiperboli |
|
Km |
|
|
Vmax |
|
|
|
Lineweavera-Burke'a |
|
Km |
|
|
Vmax |
|
|
|
Hofstee-Eadie'go |
|
Km |
|
|
Vmax |
|
|
|
Hanesa |
|
Km |
|
|
Vmax |
|
|
|
Eisenthala i Cornish-Bowdena (1) |
|
Km |
|
|
Vmax |
|
|
|
Eisenthala i Cornish-Bowdena (2) |
|
Km |
|
|
Vmax |
|
|
|
Walkera i Schmidta |
|
Km |
|
|
Vmax |
|
|
|
|
|
k2 |
|
|
E0 |
|
|
|
|
|
* błędy wyznaczania stałych kinetycznych należy obliczyć znając wpływ błędów wyznaczania korelacji liniowej w stosowanych przekształceniach rachunkowych na wartości wyliczanych parametrów
Wnioski (max 2 strony A4)
Na podstawie uzyskanych wyników i znajomości stosowanych metod rachunkowych przeprowadzić dyskusję błędów.
Porównać uzyskane wyniki z danymi literaturowymi, w szczególności należy skorzystać z informacji dostępnych w Internecie. Omówić typ kinetyki LDH, specyficzność substratową, możliwe typy inhibicji.
Dostęp do baz danych można uzyskać rozpoczynając od strony http://www.expasy.ch/enzyme/1.1.1.27
i w dalszej kolejności przeszukując inne strony, np.
http://www.brenda-enzymes.org/php/result_flat.php4?ecno=1.1.1.27