Shoot Induction, Biochemical Changes During in vitro Rooting in
Paeonia lactiflora Pall `Hortensis'
Indukcja pędu, biochemiczne zmiany podczas ukorzeniania In vitro piwonii chińskiej `Hortensis'
Streszczenie:
Wstęp: Piwonia jest ozdobną ale i leczniczą rośliną, którą trudno rozmnażać In-vitro. Największym problemem podczas kultur In vitro jest wypłukiwanie z fenoli w pożywce. Powoduje to utrudnienie wzrostu i rozwoju. Ukorzenianie jest złożonym procesem i głównym krokiem dla rozmnażania wegetatywnego. Metody: Podziemne pąki były wybierane jako eksplantaty. Mikrorozmnażanie In vitro przeprowadzono wraz z badaniami biochemicznymi podczas procesu ukorzeniania. Wyniki: Powstała indukcja pędu, proliferacja pędu i ukorzenianie. Najlepszą początkową pożywką dla odmiany `Hortensis' była: standardowa pożywka MS o dwukrotnie mniejszej zawartości składników z Ca 2+ o podwójnym stężeniu z dodatkiem 1mg/l BA, i 0,5 mg/l GA. Indukcja pędów była 100% z 6,2 pędami na eksplantacie. Ukorzenienie również obserwowano na pożywce MS o dwukrotnie mniejszej zawartości składników z dodatkiem 1mg IBA oraz IAA. Najwyższy procent ukorzenienia (15%) zaobserwowano kiedy pędy zanużono w pożywce MS płynnej o pełnym stężeniu z dodatkiem 10mg IBA bez agaru przez 5 dni a następnie przeniesiono do pożywki MS o ¼ stężeniu bez dodatku regulatorów wzrostu.
Wyniki:
Podczas mikrorozmnażania, wyciek fenoli jest bardzo powszechny i często wpływa na wynik. Tak więc, węgiel aktywny (AC) jest często stosowany w kulturach tkanek roślinnych w celu poprawy wzrostu i rozwoju komórek. Donoszono, że AC adsorbują fenole i stymulują wzrost roślin. W związku z tym w niniejszym badaniu, te które zawierały AC wysięk fenoli był ograniczony. Jest dobrze wiadomo, że węgiel aktywny może pochłaniać szkodliwe substancje w pożywce, ale może również absorbować istotne substancje odżywcze, które są wymagane do rozwoju pędów, powodując pędów więdnięcie.
Rys 1a.
Po umieszczeniu eksplantatów z podziemnych pąków na pożywce, rosły szybko w ciągu 15 dni z 4-5 liści. Te pąki zakiełkowały na głównym pędzie i pędzie bocznym.
Tabela 1 i Fot 1b i c
Najwyższy współczynnik indukcji pędów (100%) uzyskano na pożywce z dodatkiem 1,0 mg/l BA i 0,5 mg/ GA. Najwyższy współczynnik rozmnażania- 6,2 pędów na eksplantacie uzyskano również na tej samej pożywce z tymi samymi stężeniami BA i. Podwójne stężenie Ca2 + było przydatne do wzrostu roślin zielnych piwonii.
Tabela 1 dalej
Cytokininy stymulują podział komórek roślinnych i rozwoju pączków bocznych. W związku z tym, w niniejszym badaniu, gdy pąki podziemne umieszczono na pożywce z BA osiągnięto indukcję 50% pędów. Na pożywce z BA + Kin zaobserwowano indukcję 65% pędów. Podziemne pąki piwonii były najlepiej inicjowane na standardowej pożywce MS o dwukrotnie mniejszej zawartości składników (dwukrotne stężenie Ca 2+) z dodatkiem 0,2g/l IBA natomiast z dodatkiem 0,5 mg/l BA i 0,3 mg Kin był najlepszy dla proliferacji pędów. Gdy do pożywki dodano IAA oraz cytokiny wzrósł procent indukcji pędów. Ponadto dodatek IAA 1,0 mg również zwiększenie indukcji pędów (Tabela 1).
Fot 2a i b
Zastosowanie GA wykazywały znaczący wpływ na indukcję pędów i wydłużenie w hodowli P. lactiflora. GA jest dobrze wiadomo, że sprzyjają podział komórek i wydłużenie w kierunku strefy niższego apical pędów. Połączenie BA i GA jest używany do tworzenia i rozwoju pączków bocznych.
Tabela 2 i Fot 3a i b
Standardowa pożywka MS o dwukrotnie mniejszej zawartości składników uzupełniona IBA i IAA spowodowała wytworzenie dużej liczby korzeni. Obniżenie stężenia soli dwukrotnie w pożywce okazał się skuteczny dla indukcji korzeni (rys 3a). Jednakże pędy lekko zwiędły i zżółkły, prawdopodobnie ze względu na długi (30 dni) czas ekspozycji na aktywowanym węglu drzewnym. W związku z tym najwyższa ukorzeniania procent (15%) obserwowano w pożywce, zawierającej 0,1% węgla aktywowanego. Największą długość korzeni wynosiła 3,6 cm.
Tabela 3
Aktywność peroksydazy zawsze powoduje indukcję korzeni. Aktywność peroksydazy w in vitro podniesiony rośliny mniej przed indukcją ukorzeniania. Po rozpoczęciu ukorzeniania aktywność wzrosła do 0,179 ug / FW / min. Wzrost aktywności POD jest wskaźnikiem zdolności ukorzeniania. W niniejszym badaniu, przed zakorzenienia działalności IAAO był wysoki i spadła po zakorzenieni. Zawartość fenolowych był mniej więcej taki sam w zakładach piwonii przed lub po kibicowania. Aktywność PPO zwiększona w pewnym stopniu po ukorzenienia..
Wnioski:
Podsumowując, strzelać mnożenie, wydłużenia i zakorzenienie zostały osiągnięte z P. lactiflora 'Hortensis ". Szybka propagacja zielnej piwonii może skrócić okres hodowli, która jest ważna dla produkcji. Rzeczywiście, zmiany biochemiczne są dobrymi wskaźnikami zakorzenienia w piwonii, ale w tej odmiany minimalny sukces został osiągnięty. Zakorzenienia, hartowania i aklimatyzacja muszą być unormowane w przyszłych badaniach, jako sukces ukorzenienia procent było bardzo mniej.