DSCF6848 jpeg

7.2, Metody bndań cytologicznych

Cytologia jest nauką o budowie i czynnościach komórek roślinnych i zwierzęcych Jej rozwój Wiązał sic z postępem w konstrukcji mikroskopów, dzięki którym uczeni mogli coraz głębiej wnikać w strukturę komórkową. Szczególną rolę odegrała imaj mikroskopia elektronowa, której zastosowanie pozwoliło poznać budowę poszczególnych organelli komórkowych, losy znakowanych prekursorów różnych składników komórki (autoradiógrafia), czy aktywności enzymów (cytochemiaj Wszystkie metody cytologiczne opierają się na badaniu żywych komórek i tkanek (badania przyżyciowe) i materiału utrwalonego w różnorodny sposób.

7.2.1. Metody przyżyciowe badania komórki

Punkt odniesienia w badaniach cytologicznych powinna zawsze stanowić żywa komórka. Obserwacje komórki mogą dostarczyć nic tylko informacji o jej morfologii (pozwalając na konfrontację z wyglądem preparatów utrwalonych), lecz także szeregu danych z zakresu struktury, charakterystyki chemicznej i zawartości suchej masy poszczególnych jej składników. Jedynie na drodze obserwacji przyżyciowych można"' badać bezpośrednio nich komórek i ich składników. Komórka żywa w trakcie lub po| zakończeniu obserwacpliznanych za przyżyciowe powinna:    ^

1)    wykazywać ruch cytoplazmy,

2)    ulegać plazmolizie (ewentualnie także deplazmolizie).

3)    barwić się wybiórczo barwnikami przyżyciowymi.

Z punktu widzenia dalszych obserwacji cytologicznych bardzo istotne znaczenie ma uilpow iednie przygotowanie preparatu mikroskopowego.

Pre pa ra ty m i kr ośko po we dzielimy na bezpośrednie (przyżyciowe) sporządzane dla obserwacji kształtu i ruchu komórek (wyniesieniu do niiteóorgamzmów) jak i określenia ilości żywych komórek i prep^jy^utnyatofi wykorzystywane do dalszego barwienia w celu uwidocznienia poszczególnych organelli komórkowych.

7.2.1.1. Technika sporządzania preparatów mikroskopowych bezpośrednich

Preparaty mikroskopowe sporządza się na specjalnie do celu przystosowanych szkiełkach przedmiotowych. Przed przygotowaniem preparatu szkiełko takie należy od tłuścić" przez przemycie a 1 kolio I ecu . etylowym _ lub ęhlorofojjnem, albo opalenie w płomieniu palnika. Materiał biologiczny przeznaczony do badań należy równie/.

wat spośól umożliwiający obserwacje w mikroskopie. Hodowle kiiUut

m