średnicę plamki: d - 1,22 XI H-sinar, gdzie X jest długością fali użytego światła, n - współczynnikiem załamania ośrodka otaczającego preparat, zaś a połową kąta, jaki tworzą skrajne promienie wysyłane prze świecący punkt wchodzące do obiektywu. Iloczyn n -sin a = A nazywa się aperturą liczbową mikroskopu. Obrazy dwóch leżących blisko siebie punktów przedmiotu zachodzą na siebie i mogą się zlewać w jedną plamę lub zaznaczać oddzielnie. Umownie przyjmujemy, że obrazy są rozdzielone, gdy maksimum natężenia I w obrazie jednego punktu przypada na pierwszy ciemny pierścień w obrazie drugiego punktu, czyli odległość środków jasnych plamek wynosi dl2 (rys.2b).
Zdolność rozdzielczą mikroskopu obliczmy z wzoru:
^ _ A _ n-slna ' ~~X~ X '■
Można ją powiększyć, umieszczając przedmiot w cieczy o dużym współczynniku załamania (w tzw. cieczy immersyjnej) i używając światła o krótkiej fali, np. fioletowego. Najmniejsza dająca się dostrzec odległość między dwoma punktami przedmiotu wynosi:
,, 0,6 U
d=- .
n-sino:
Względnym współczynnikiem załamania światła n przy jego przejściu z ośrodka I do ośrodka II nazywamy stosunek prędkości światła v\ w ośrodku I do
Rys.2. Wpływ dyfrakcji na zdolność rozdzielczą mikroskopu
prędkości światła Uj w ośrodku Et:
Jeśli pierwszym ośrodkiem jest próżnia, to nt, jest bezwzględnym współczynnikiem załamania światła drugiego ośrodka:
Rys.3. Zjawisko załamania światła (a - kąt padania, /? -kąt załamania)
gdzie c jest prędkością światła w próżni, a v - w ośrodku II. Wartość bezwzględnego współczynnika załamania charakteryzuje gęstość optyczną ośrodka. Ośrodek o dużej wartości n* nazywa się optycznie gęstszym od ośrodka o mniejszej wartości «*. Zazwyczaj ośrodkiem I jest powietrze. Gdy światło przechodzi z ośrodka „optycznie gęstszego” (np. szkła) do powietrza, to n’=l/n.
Można dowieść, że stosunek sinusa kąta padania a do sinusa kąta załamania y?jest równy wględnemu współczynnikowi załamania światła n (rys.3):
sinfl sin fi
Zadanie 1
Pomiar powiększenia obiektywu i obserwacja dostarczonych preparatów.
Oświetlamy pole widzenia mikroskopu przez ustawienie pod odpowiednim; kątem lusterka, na które kierujemy wiązkę światła. Następnie umieszczamy na stoliku dostarczone preparaty i dobieramy odpowiednie powiększenie obiekty--1 wu. Przy ustawieniu na ostrość należy uprzednio obiektyw opuścić możliwie) nisko, a następnie patrząc przez okular, podnosić powoli do góry. Chronimy V,t