SEDYMENTACJA- zjawisko polegające na osadzaniu cząsteczek zawiesiny pod wpływem Siły ciężkości lub odśrodkowej.
• Praktycznie: w wirówce pod wpływem siły odśrodkowej Probówkę umieszcza się w roztworze pod kątek 45°. ale najczęściej pod kątem 90". Warunki sedymentacji: to czas i przeciążenie.
. 4n2V2r Przeciążenie: Ag—
V- częstotliwość r- pr. wirowania il- przyśpieszenie
9
Również, przeciążenie obliczamy ze wzoru:
Ag = 11.2 • (-^-)2 • r
° '1000
Prędkość s. określamy po opisaniu sil działających na cząsteczkę zawiesiny pod wpływem wirowania: Sętięmąt pltrawirówki: F, - siła odśrodkowa
Fn - siła wyporu F, - siła lepkości
Fn — Fw + F[
u»*r
= f V(Pż - Pc)
[S]=10'*s-* podajemy go w tak zwanych stałych Svedbcrga
Ciężar cząsteczkowy obliczamy z równania Sredbcrea- Pederyma:
M =
oi- prędkość kątowa r- promień
Pt- gęstość cząsteczki zawiesiny p, -gęstość cieczy V- objętość cząsteczki zawiesiny f- współczynnik
S- współczynnik sedymentacji -^prędkość przemieszczenia się cząsteczki na jednostkę przy śpieszenia odśrodkowego.
P = - - jest to objętość właściwa, czyli stos. objętości cząstki do jej masy dx V
Gdy p, = Pc. wówczas — ■ 0 dt
Wirowanie zawiesiny zaczy na się na r-r soli metalu ciężkiego (Cs. Re). Jego gęstość zamienia się wzdłuż osi probówki w sposób skokowy (gradient skokowy) lub ciągły (gradient ciągły). Oprócż CsCI (p = 1,13 - 1.9 - łO1 kgón') do wirowania zawiesiny nuklcoprotcidów stosuje się octan cezu lub CsSO*'. Wirowanie w gradiencie gęstości uniemożliwia rozdział DNA wedłueskładu nuklcotydowcgo. Gradient gęstości wzrasta w probówce według:
5«z/» <-—r
' d~i U c.*- U hu
■JU- • X-
\
■S