7. W których probówkach stwierdziłeś obecność maltozy po zakończeniu doświadczenia?
8. Dlaczego w pozostałych probówkach nie stwierdzono maltozy?
9. Amylaza ślinowa jest w znacznym stopniu inaktywowana w żołądku. Na podstawie uzyskanych wyników powiedz dlaczego?
Ćwiczenie 2
Amylaza ślinowa i celuloza
Jeżeli na statywie inkubatora pozostały jakiekolwiek probówki, kliknij na nie i przenieś je do zmywarki probówek jeszcze przed rozpoczęciem tego ćwiczenia.
W poprzednim ćwiczeniu badaliśmy aktywność amylazy ślinowej i jej zdolność do trawienia skrobi. W tym ćwiczeniu będziemy badać czy amylaza ślinowa może rozłożyć celulozę, substancję, która występuje w ścianie komórkowej komórek roślinnych. Oceniamy także czy bakterie (takie jak te znajdujące sięw przedżołądkach przeżuwaczy) mogą trawić celulozę oraz czy peptydaza (enzym trzustkowy rozkładający peptydy) może trawić skrobię.
1. Kliknij na probówkę wiszącą najbliżej inkubatora, przenieś ją do uchwytu nr 1 znajdującego się na górze inkubatora i zwolnij przycisk myszki. Probówka „wskoczy” w uchwyt. Powtórz tę czynność wstawiając probówki w uchwyt nr 2, nr 3 itd., aż do wypełnienia wszystkich siedmiu uchwytów na górze inkubatora.
2. Napełnij siedem probówek trzema substancjami w następujący sposób:
Probówka # 1: amylaza, skrobia (starch), bufor pH 7.0
Probówka #2: amylaza, skrobia, bufor pH 7.0 Probówka #3: amylaza, glukoza, bufor pH 7.0 Probówka #4: amylaza, celuloza, bufor pH 7.0 Probówka #5: amylaza, celuloza, woda dejonizowana Probówka #6: peptydaza, skrobia (starch), bufor pH 7.0 Probówka #7: bakterie, celuloza, bufor pH 7.0
Aby to zrobić kliknij na zakraplacz znajdujący się na każdej butelce z podawaną substancją, przenieś go do odpowiedniej probówki i zwolnij przycisk myszy.
3. Kliknij cyfrę „1” pod probówką #1. Probówka zostanie wsunięta do inkubatora. Następnie kliknij przycisk Zamroź (FREEZE). Probówka zostanie zamrożona i
powróci na miejsce.
4. Upewnij się, że temperatura inkubacji jest ustawiona na 37C i że stoper ustawiony jest na 60 minut. Jeżeli nie, użyj przycisków (+) lub (-).
5. Kliknij przycisk Inkubuj (INCUBATE). Wszystkie probówki zostaną wsunięte do inkubatora i podczas inkubacji będą ostrożnie wytrząsane. Po zakończeniu okresu inkubacji probówki powrócą na miejsce i otworzą się drzwi do komory analitycznej.
W komorze znajduje się siedem pustych probówek i dwie butelki z kroplomierzem. Butelki te zawierają odczynnik IK1 i Benedicta. Odczynnik IK1 służy do wykrywania obecności skrobi, zaś odczynnik Benedicta obecności cukrów takich jak glukoza lub maltoza. Dodając te odczynniki do siedmiu eksperymentalnych probówek będziesz mógł stwierdzić, czy doszło do trawienia czy nie.
6. Kliknij na probówkę U\ w uchwycie 1 na inkubatorze. Zobaczysz, że kursor zmienił się w miniaturową probówkę. Przenieś tę miniaturową probówkę do krawędzi pierwszej od lewej probówki w komorze, a następnie zwolnij przycisk myszy.
Zawartość miniaturowej probówki zostanie przeniesiona do probówki znajdującej się
w komorze.
’■ Powtórz krok 6 z pozostałymi probówkami, zachowują jednak odpowiednią kolejność izn. probówkę #2, następnie #3 itd.
3