5(3) antastic pl

PEPSYNA

Białka są zbudowane z podjednostek zwanych aminokwasami, do których są rozkładane przez odpowiednie enzymy. Przykładem takiego enzymu jest pepsyna. Jest ona wydzielana przez gruczoły żołądkowe w formie nieaktywnego proenzymu, zwanego pepsynogenem, który jest przekształcany do pepsyny w kwaśnym pH żołądka. Białka są hydrolizowane lub trawione w żołądku w bardzo znacznym, choć zmiennym stopniu. Uważa, że około 15% białka pokarmowego jest rozkładane do aminokwasów przez pepsynę. Większość trawienia białka odbywa się w dwunastnicy.

Ćwiczenie 3:

Trawienie białka przez pepsynę

W następnym ćwiczeniu będziesz miał za zadanie zbadanie wpływu pepsyny na syntetyczne białko - BAPNA. Kliknij na zakładkę EXPER1MENT na górze ekranu, a następnie wybierz PEPSIN. Na ekranie zobaczysz obraz, który nieco różni się od poprzedniego, na którym pracowałeś przy ćwiczeniach dotyczących amylazy. Wśród butelek z zakraplaczami znajdują się teraz butelki zawierające pepsynę i BAPNA. BAPNA jest bezbarwna i przezroczysta w roztworze, ale przy trawieniu enzymem takim jak pepsyna zmienia barwę na żółtą i nie trzeba dodawać żadnych innych dodatkowych odczynników, aby sprawdzić czy białko uległo strawieniu czy nie.

1.    Kliknij na probówkę wiszącą najbliżej inkubatora, przenieś ją do uchwytu nr 1 znajdującego się na górze inkubatora i zwolnij przycisk myszki. Probówka „wskoczyć w uchwyt. Powtórz tę czynność wstawiając probówki w uchwyt nr 2, nr 3 itd., aż do momentu, gdy sześć z siedmiu uchwytów na górze inkubatora zawiera probówki. (Inaczej niż poprzednio, ponieważ teraz pracujemy z sześcioma probówkami).

2.    Napełnij sześć probówek trzema substancjami w następujący sposób:

Probówka #1: pepsyna, BAPNA, bufor pH 2.0

Probówka #2: pepsyna, BAPNA, bufor pH 2.0 Probówka #3: pepsyna, woda dejonizowana, bufor pH 2.0 Probówka #4: woda dejonizowana, BAPNA. bufor pH 2.0 Probówka #5: pepsyna, BAPNA, bufor pH 7.0 Probówka #6: pepsyna, BAPNA, bufor pH 9.0

Aby to zrobić kliknij na zakraplacz znajdujący się na każdej butelce z podawaną substancją, przenieś go do odpowiedniej probówki i zwolnij przycisk myszy.

3.    Kliknij cyfrę „T pod probówką #1. Probówka zostanie wsunięta do inkubatora. Następnie kliknij przycisk Zagotuj (BOIL). Probówka zostanie zagotowana i powroci

na miejsce.

4.    Upewnij się, że temperatura inkubacji jest ustawiona na 37C i że stoper ustawiony jest na 60 minut. Jeżeli nie, użyj przycisków (+) lub (-).

5.    Kliknij przycisk Inkubuj (INCUBATE). Wszystkie probówki zostaną wsunięte do inkubatora i podczas inkubacji będą ostrożnie wytrząsane. Po zakończeniu okresu inkubacji probówki powrócą na miejsce i otworzą się drzwi do komory analitycznej. Kiedy otworzą się drzwi komory, zobaczysz spektrofotometr, który mierzy ilość światła absorbowaną przez roztwór (tzw. gęstość optyczną). Będziesz wykorzystywał spektrofotometr do zmierzenia intensywności żółtego barwnika, który jest uwalniany w trakcie „trawienia" BAPNA. Aby t zrobić musisz przenieść każdą probówkę do spektrofotometru i kliknąć ANALYZE. Spektrofotometr skieruje wiązkę światła przez roztwór, aby zmierzyć gęstość optyczną roztworu. Im wyższa jest gęstość optyczna, tym silniejsze było trawienie BAPNA.

6.    Kliknij na probówkę #1, przenieś ją do spektrofotometru i zwolnij przycisk myszy.