Dalszy wzrost roślin odbywa się w fitotronie. Jest to pokój wzrostowy I wyposażony w stelaże z oświetlonymi półkami. Lampy jarzeniowe (ryc. 53) zapewniają roślinom światło przez 16 godzin na dobę. Natężenie oświetlenia powinno wynosić 1000-3000 lx, co odpowiada w przybliżeniu natężeniu napromienienia kwantowego 12,5-37,5 pmol-nr2,S'' (dla lamp jarzeniowych o świetle białym).
Temperaturę utrzymuje się w fitotronie w zakresie 17-28°C. Dla większości kultur zakres ten jest węższy i wynosi 22-26°C. Wilgotność względna powietrza wynosi 70-80%.
Namnożone rośliny można przez kilka miesięcy, a nawet lat, przechowywać w chłodni o temperaturze 4-10°C. Wystarczające jest przy tym słabe światło o natężeniu 400-1000 lx. W temperaturze 4-5°C i natężeniu oświetlenia 600 lx, ukorzenione sadzonki chryzantem można przechowywać na tej samej pożywce przez pół roku.
W skład pożywki wchodzą: woda, sole mineralne i cukier, a jeśli forma pożywki jest stała - również agar. Uzupełniają ten skład regulatory wzrostu, witaminy, aminokwasy i węgiel aktywny (tab. 5).
Murashige i Skoog (1962) są autorami pożywki uniwersalnej, najczęściej wykorzystywanej w kulturach in vitro. Pożywki Knudsona (1946) i Morela (1974) służą dobrze storczykom (Cymbidium, Dendrobium, Cattleya), a pożywka Phillipsa (1968) - goździkom szklarniowym, rozmnażanym z eks-plantatów merystematycznych.
Makro- i mikroelementy zawarte w solach mineralnych są podstawą każdej pożywki. Równie ważny jest cukier, ponieważ izolowane in vitro rośliny tracą zdolność przyswajania dwutlenku węgla, stają się heterotrofa-mi i bez cukru nie mogą się obejść.
Autor i rok opracowania | ||||
Związek |
Knudson I 1946 |
Murashige I i Skooe 1962 |
Phillips 1968 |
Morel 1974 |
KNOj |
_ |
1900 t |
125 1 | |
NaNO |
_ |
_ |
_ ; | |
Ca(No,)j • 4H20 |
1000 |
500 |
500 | |
nh4no3 |
- |
1650 | ||
(nh4)2so4 |
500 |
- |
_ |
1000 |
MgSo„ • 7H20 |
250 |
370 |
125 |
125 |
NaH2PO., • Ul |
_ |
_ |
— |
H |
kh2po4 |
250 |
170 |
125 |
125 |
CaCI. • 2H O |
— |
440 |
_ |
- |
KCI |
- |
- |
_ |
1000 |
KJ |
— |
0,83 |
0,25 |
0,01 |
HJB04 |
6,2 |
0,025 |
1,0 | |
MnS04 • 4H20 |
7,5 |
22,3 |
1,0 |
0,1 |
ZnS04 • 7 H20 |
- |
8,6 |
0,05 |
1 |
Na2Mo04- 2H20 |
— |
0,25 |
- |
_ |
FeCl, • 6H20 |
— |
- |
1,0 | |
FeSO„- 7H20 |
25 |
27,8 |
25 |
- |
Na'EDTA |
- |
37,3 |
- | |
CuS04 • 5H20 |
- ' |
0,025 |
0,025 |
0,3 |
CoCI2 • 6H20 |
- |
0,025 |
0,025 |
- |
NiCI2 • 6H20 |
- |
- |
0,025 |
_ |
ALCI, |
- |
- |
- |
0,03 |
Sacharoza |
20* |
30-50* |
40* |
20* |
Mioinozytol |
- |
100 |
- |
- |
Kwas nikotynowy |
- |
0,5 | ||
Pirydoksyna HCI |
- |
0,5 |
- | |
Tiamina HCI |
- |
0,1 |
1,0 | |
Glicyna |
- |
2,0 |
- |
_ |
Kwas cytrynowy |
- |
~ |
~ |
125 |
| Wartości wyrażone w g-l
Agar jest polisacharydem złożonym głównie z galaktozy. Do pożywki dodaje się na ogół 5-10 g agaru na I litr roztworu. Na pożywkach płynnych (bez agaru) eksplantaty umieszcza się na mostku z bibuły filtracyjnej w kształcie litery M lub odwróconej litery V.
Regulatory wzrostu, zwane również substancjami wzrostowymi: