Zawartość kolby ni 1 zagotuj nad palnikiem w celu denaturacji enzymu, a następnie ostudź. Do każdej Kolby dodaj 2 krople fenoloftaleiny. Zawartość każdej kolby miareczkuj przy użyciu 0,1 M roztworu NaOH. Podczas miareczkowania mieszaj energicznie zawartość kolbek, szczególnie pod koniec miareczkowania. Pamiętaj, aby intensywność barwy w obu kolbach po miareczkowaniu była identyczna. Wykonaj obliczenia: Wyniki miareczkowania należy przedstawić jako ilość milimoli kwasów tłuszczowych uwolnionych przez 100 mL soku trzustkowego.
1 mL 0,1 M NaOH = 1 mL 0,1 M kwasu tłuszczowego = 1 mL 100 mM kwasu tłuszczowego
^ NaOH ~ V NaOH próby badanej — V NaOH próby ślepej
W reakcji użyto 2 mL soku trzustkowego. Aktywność lipazy trzustkowej oblicz dla 100 mL soku trzustkowego.
V NaOH - 2 mL soku trzustkowego Vx NaOH - 100 mL soku trzustkowego
Vx NaOH == 50 * V NaOH
Aktywność lipazy = Vx NaoH x 100 mM Ćwiczenie 5. Oznaczanie kwasowości soku żołądkowego,
Do trzech kolbek stożkowych odmierz kolejno po 10 mL badanego soku żołądkowego: normalnego, nadkwaśnego i bezkwaśnego. Następnie do każdej kolbki dodaj po 2 krople oranżu metylowego i miareczkuj 0.1 M NaOH do uzyskania trwałej barwy pomarańczowo-żółtej. Zanotuj ilość zużytego roztworu NaOH, a następnie dodaj do kolb po 2 krople fenoloftaleiny i miareczkuj dalej 0,1 M NaOH do uzyskania trwałej barwy różowej,
Dla każdego rodzaju kwasu żołądkowego oblicz wartość kwasowości wolnej, związanej i całkowitej (jednostka: ilość 0,1 M NaOH użytego w miareczkowaniu w przeliczeniu na 100 mL soku żołądkowego).
II. Wykrywanie nieenzymatycznych składników soków trawiennych.
Ćwiczenie 6. Wykrywanie białka w ślinie metoda biuretową.
Do jednej probówki dodaj 1 mL śliny, a do drugiej 1 mL wody destylowanej. Następnie do obu probówek wiej po 2 krople 10% roztworu NaOH i po 2 krople roztworu CuS04. Porównaj zabarwienie i sformułuj
wniosek.
Ćwiczenie 7. Wytracanie mucyny ze śliny.
Do 3 mL śliny dodaj 5 kropli 0,1 M roztworu CH3COOH. Zaobserwuj wytrącenie się kłaczkowatego osadu mucyny.
Ćwiczenie 8. Wykrywanie reszty cukrowej w mucynie,
Do wytrąconej w ćwiczeniu 7 mucyny dodaj 3 mL stężonego kwasu solnego. Probówkę wstaw do wrzącej łaźni wodnej na 10 minut. Obserwuj zmianę barwy roztworu i sformułuj wnioski.
Ćwiczenie 9. Wykrywanie kwasów żółciowych
Do probów^dodarrmL roztworu kwasów żółciowych, a następnie kryształek sacharo^ Zawartość probówki wymieszaj, a następn.e wiej ostrożnie po ściankach 1 mL stężonego roztworu H2SO< Zaobserwuj powstanie purpurowego pierścienia na granicy warstw. Sformu uj wmo
Do jednej probówki wiej 1 mL roztworu kwasów żółciowych, róznicę mtędzy probówkami
Następnie do obu probówej dodaj odrobinę siarki sublimowanej. Zaobserwuj rozmcę między p
i sformułuj wniosek.
Ćwiczenie 10. Wykrywanie bilirubin^w Żółci - reakcja Gmejiną