ScannedImage 10

Po wymieszaniu wszystkich prób w probówkach zmierzyć absorbcję przy 450 nm próby 2 względem 1, próby 4 względem 3 itd. Sporządzić wykres zależności ilości powstającego produktu mierzonej absorbancją próby przy 450 mn od pH mieszaniny inkubacyjnej (czyli pH, w którym działał enzym).

2. Wpływ etanolu, chlorku sodu i fosforanu sodu na aktywność kwaśnej fosfatazy.

Schemat doświadczenia ilustrującego wpływ etanolu, chlorku sodu i fosforanu sodu na aktywność kwaśnej fosfatazy.

Numer próby	Dodać po Iml buforu o pH 5,0 (zawierającego rozpuszczony p-nitrofenylo- fosforan)	Dodać po Imi	Dodać po 4mł 0,1M NaOH	Dodać po 0,2ml enzymu	Po 15 min. inkubacji w temperaturze pokojowej dodać po 4ml 0,1M NaOH
				i wymieszać
1	+	H20	4*	4-	-
2	4-	h2o	-	+	4-
3	+	50% etanolu	4-	4-	-
4	4-	50% etanolu	-	4-	4-
5	4-	2M NaCl	4-	4-	-
6	4-	2M NaCl	-	4-	4-
7	4-	0,lMNaH2PO4	+	4-	-
8	+	0,lMNaH2PO4	-	4-	4*

Po wymieszaniu prób w probówkach zmierzyć absorbcję przy 450 nm próby 2 względem 1, próby 4 względem 3 itd. Zaznacz na wykresie ilość produktu powstałego w mieszaninach inkubacyjnych zawierających: 25% etanol, IM NaCl, 50mM NaH₂P0₄ w stosunku do mieszaniny kontrolnej (próba nr 2). Napisz jaki wpływ na aktywność kwaśnej fosfatazy ma etanol, NaCl, NaH₂P0₄ i dlaczego?

10