Skan00

Przygotowanie zawiesiny faga do przechowywania obejmuje ^: ' szereg czynności. Lizat fagowy, po oznaczeniu miana faga, roz-lać jałowo do ampułek, zatopić i przechowywać według przyjętych zasad. Kie zapomnieć o bardzo dokładnym opisaniu kolekcjonowanych szczepów.

Większość fagów daje się dobrze przechowywać jako zawiesina w bulionie odżywczym, surowicy, płynie wysiękowym itp. Fagi inaktywują się natomiast łatwo w roztworach soli, a także w pożywkach syntetycznych. Dobrze jest dodać do pożywki bezbiałko-wej kilka mcg/ml żelatyny lub innego białka. Ampułki z zawiesiną faga przechowywać w zaciemnieniu i w temperaturze chłod-

ni (4°).

Fagi

promieni słonecznych 12- łub 5-krotne naświetlanie, łącznie

przez 3 h), promieni X + 0₂, promieni uf ("10 - 15 min). Optymalne dla fagów pH środowiska wynosi ^,6 - S^5« W porównaniu z bakteriami ich oporność na środki dezynfekcyjne jest wyższa: 96% alkohol etylowy inaktywuje fagi do 48 h, pary formaliny zabijają je szybciej; 0,05% roztwór sublimatu i 1% fenol nie wywierają na nie widocznego wpływu; pepsyna i trypsyna niszczą fagi stosunkowo powoli; eter, chloroform, toluol, riwanol, zieleń malachitowa działają na fagi bardzo słabo.

Przygotować -12 płytek z grubą warstwą agaru odżywczego, minimum 2 mm i przesuszyć je w cieplarce, chroniąc przed zakażeniem. Przygotować 10-krotne rozcieńczania badanej zawiesiny faga. Do probówek zawierających po 2,5 El rozpuszczonego

dodać po 0,5 ml każdej rozcieńczonej zawiesiny faga i po 0,2 ml 18-goazinnej hodowli szczepu wskaźnikowego. Zawartość probówek dokładnie wymieszać i wylewać natychmiast na powierzchnię