Najkorzystniej jest szczepić podłoże hodowlą z końca fazy logarytmicznej lub początku stacjonarnej.
Szczepy należy utrwalać w roztworze zawierającym niewielką koncentrację składnika selekcjonującego.
Żywotność szczepów należy sprawdzić przed i po utrwaleniu i ważne jest określenie liczby komórek unieczynnionych podczas utrwalania.
Kryteria pełnej oceny i charakterystyki szczepów przemysłowych utrwalonych i przechowywanych uwzględniają:
1) ocenę morfologiczną oraz biochemiczną
2) procent odzysku (po 6 miesiącach, po I roku i po dłuższym okresie przechowywania)
3) analizę stabilności cech podczas rozwoju w skali laboratoryjnej oraz produkcyjnej
uwodnienie środowiska ciśnienie osmotyczne temperatura pH
natlenienie potencjał oksydacyjno - redukcyjny napięcie powierzchniowe
Wyczerpanie składników odżywczych, niedostatek tlenu, zmiana pH, zahamowanie wzrostu przez produkty metabolizmu
Bacterial Growth Curve
t Statlcnary Phase f
Większość drobnoustrojów wymaga do swojego rozwoju aktywności wodnej w zakresie 0,95-0,99.
Minimalne wartości aw przy których drobnoustroje mogą się jeszcze rozmnażać, mieszczą się w szerokich granicach, 0,60- 0,98, zależnie od rodzaju, gatunku i szczepu.
pH środowiska
Mechanizm działania pH środowiska na aktywność, wzrost i rozmnażanie drobnoustrojów jest bardzo złożony. Jego wpływ na drobnoustroje należy rozważać w dwóch płaszczyznach:
Drobnoustroje rosną w podłożach o szerokim zakresie pH.
Dla większości drobnoustrojów obszar optymalny znajduje się w zakresie pH od 4 do 9.
1) jony H+ i OH- odgrywają istotną rolę w bezpośredniej regulacji procesów metabolicznych, przede wszystkim wpływają na szybkość reakcji enzymatycznych
2) decyduje o stopniu dysocjacji słabych zasad i kwasów znajdujących się w podłożu, niezdysocjowane formy łatwiej mogą wnikać do komórki i wykazu jąsilne działanie toksyczne
Dla większości bakterii optymalny poziom pH znajduje się w zakresie odczynu obojętnego.
Dla hodowli drożdży najkorzystniejszymi są wartości pH 4-6.