Witamina C ma właściwości redukujące. Do oznaczania jej zawartości w produktach żywnościowych najczęściej stosuje się błękit metylenowy oraz 2,6-dichlorofenolindofenol. Jest to wskaźnik redoksymetryczny o potencjale standardowym £° = 0,66 V. W roztworze wodnym w środowisku kwaśnym przyłącza on dwa kationy wodorowe. Forma utleniona wskaźnika jest barwy ciemnoniebieskiej, natomiast zredukowana jest bezbarwna.
forma utleniona forma zredukowana
(ciemnoniebieska) (bezbarwna)
W trakcie oznaczania zawartości witaminy C opisywaną metodą przy użyciu 2,6-dichlorofenoluindofenolu zachodzi redukcja barwnika przy jednoczesnym utlenianiu kwasu L-askorbinowego.
Odczynniki
1) 2% roztwór HC1
2) 0,0005 M roztwór 2,6-dichlorofenoluindofenolu Sposób wykonania
Próbkę otrzymanego soku grejpfrutowego rozcieńczyć w kolbie miarowej na 100 cm3. Następnie z rozcieńczonej i wymieszanej próbki pobrać pipetą 25 lub 20 cm3 roztworu. Pobraną próbkę rozcieńczyć 10 cm3 wody oraz dodać około 1 cm3 2% HC1. Całość miareczkować 0,0005 molowym roztworem 2,6-dichlorofenoluindofenolu do lekko różowego zabarwienia. Zawartość witaminy C (mg) oblicza się następująco:
1 cm3 0,0005 molowego roztworu barwnika odpowiada 0,088 mg witaminy C.
Nastawianie miana barwnika
Do kolby stożkowej odpipetować 5cm3 kwasu askorbinowego o stężeniu 0,005 M, dodać 20 cm3 buforu o pH 3,3 (100 cm3 1% kwasu fosforowego^) oraz 178 cm3 0,5 M roztworu octanu sodu). Całość miareczkować roztworem barwnika do pojawienia się różowej barwy. Stężenie molowe barwnika oblicza się korzystając z zależności, że 1 mol barwnika reaguje z 1 molem kwasu askorbinowego.
Serem nazywamy produkt otrzymany z mleka lub śmietanki przez wydzielenie z nich części stałych w drodze kwaśnienia naturalnego, względnie działania enzymu podpuszczki. Ponieważ w naturalnie otrzymanym produkcie zawartość chlorku sodu jest niewielka stosuje się jego dodatek w celu podniesienia walorów smakowych. W zależności od asortymentu ilość dodawanej soli powinna być zgodna z normami branżowymi, dlatego istnieje potrzeba oznaczania tego związku w końcowym wyrobie.
Odczynniki
1) 1 M roztwór NaOH
2) (1:2) roztwór HNO3
3) 0,1 M roztwór AgN03
4) roztwór nasycony siaczanu(VI) żelaza(III) i amonu (NfUFe(S04)2)
5) 0,1 M roztwór NH4SCN
Sposób wykonania
Do kolby stożkowej o pojemności 250 cm3 wsypać około 4 gramów utartego wcześniej sera odważonego z dokładnością do 0,0 lg. Dodać 50 cm3 wody destylowanej o temperaturze 50°C oraz 10 cm3 1 M NaOH.
233