skanuj0012 (71)

ty &a

•    Teoretycznie, ilość produktu po zakończeniu reakcji powinna być wykładniczo proporcjonalna do początkowej puli analizowanej sekwencji w badanej próbce przed reakcją (podwajana w każdym cyklu reakcji PCR).

•    W praktyce obserwuje się różnice w ilościach powstałych produktów końcowych ze względu na osiągnięcie plateau w kinetyce reakcji.

-    zużyciem starterów i nukleotydów,

-    spadkiem aktywności poiimerazy

-    konkurencją pomiędzy starterami a produktem o matrycę

Tradycyjna PCR

⁹ detekcja produktu reakcji - po zakończeniu reakcji (tzw. metoda punktu końcowego)

•    wady detekcji w punkcie końcowym:

-    słaba precyzja

-    niska czułość

-    niska rozdzielczość

-    cena produktu tylko na podstawie wielkości

-    czasochłonna

-    nie daje się zautomatyzować

•    może służyć jedynie do półilościowej oceny wyjściowego DNA