2 (797)

Sterylne s/ulkl Potnego oznaczyć dormatogrnfom Wpliująi nu nu li w li/mh powtór/o nlach numer grupy I zespołu studentów oraz rodzą) mikroorganizmów według schematu

•    Bakterie B 10⁴, B 10 ‘, B 10-"

•    Promieniowce: P 10'³, P10"⁴, P 10^-6

•    Grzyby G 10^-3, G 10^M

-    Po zakończeniu wytrząsania gleby z kolbki stożkowej oznaczonej 10"' przenieść za pomocą pipety 10 cm³ zawiesiny gleby do kolbki oznaczonej 10"³, wymieszać Nową pipetą pobrać 10 cm³ płynu z kolbki oznaczonej 10“² i przenieść do kolbki oznaczonej 10"³ i zmieniając za każdym razem pipetę postępować analogicznie z pozostałymi kolbkami, aż do uzyskania rozcieńczenia 10"*

-    Z kolbek oznaczonych 10"⁴, 10"⁵ i 10"® pobrać w trzech powtórzeniach sterylnymi pipetami (jedna pipeta dla jednego rozcieńczenia) po 1 cm³ płynu i przenieść do sterylnych szalek Petriego oznaczonych: B10"¹, B10'⁵ oraz B10"*

-    Z kolbek oznaczonych 10"³, 10"* i 1(T^S pobrać w trzech powtórzeniach sterylnymi pipetami (jedna pipeta dla jednego rozcieńczenia) po 1 cm³ płynu i przenieść do sterylnych szalek Petriego oznaczonych: P10"³, PICT⁴, P10"⁵.

-    Z kolbek oznaczonych 10"³ i KT* pobrać w trzech powtórzeniach sterylnymi pipetami (jedna pipeta dla jednego rozcieńczenia) po 1 cm³ płynu i przenieść do sterylnych szalek Petriego oznaczonych: G10'³, GIO^.

-    -Do szalek z rozcieńczeniami gleby oznaczonych literą B (bakterie), wlać techniką sterylną ostudzoną do około 45°C pożywkę Bunta i Roviry w ilości około 15 cm³, tak aby pokryła ona dno szalki. Następnie delikatnie wymieszać zawiesinę gleby z pożywką przesuwając szalkę kolistym ruchem po powierzchni stołu.

-    Do szalek z rozcieńczeniami gleby oznaczonych literą P (promieniowce), wlać techniką sterylną ostudzoną do około 45°C pożywkę Cyganowa i wsp. w ilości około 15 cm³, tak aby pokryła ona dno szalki. Następnie delikatnie wymieszać zawiesinę gleby z pożywką przesuwając szalkę kolistym ruchem po powierzchni stołu

-    Do szalek z rozcieńczeniami gleby oznaczonych literą G (grzyby), wlać techniką sterylną ostudzoną do około 45°C pożywkę Martina w ilości około 15 cm³, tak aby pokryła ona dno szalki. Następnie delikatnie wymieszać zawiesinę gleby z pożywką przesuwając szalkę kolistym ruchem po powierzchni stołu.

-    Szalki Petriego po zastygnięciu pożywki umieścić w cieplarce w temperaturze 20°C, ułożone dnem do góry, co zapobiega wysychaniu pożywki.

Część B

17.4. Wyniki

Określić liczebność bakterii, promieniowców i grzybów w 1 gramie suchej masy

gleby.

-    Do obliczania liczby mikroorganizmów użyć po jednym rozcieńczeniu bakterii, promieniowców i grzybów, wybierając takie, w którym na jednej szalce znajduje się od 30 do 300 kolonii (dla grzybów około 50). Szalki z pozostałymi rozcieńczeniami odrzucić (koniecz-

mość posmwu kilku ioj> i»ńi /nM wyniku / lego, 1/ przystępując do .innli/y mikrobiologu t nej nie można piznwiil/mć Która z nich będzie miało odpowiednią do liczenia Ilość kolonii)

-    Posługując się licznikiem, policzyć kolonie wyrosłe na trzech powtórzeniach wybmneu" rozcieńczenia I obili/yć wartość średnią, osobno dla bakterii, promieniowców I gi/ybów Do liczenia szalki umieścić na pulpicie licznika dnem do góry, ustawić lupę w połataniu zapewniającym najlepszy obraz i każdą kolonię w trakcie liczenia zaznaczać dermutou'* fem (w celu uniknięcia kilkukrotnego liczenia tej samej kolonii).

-    Wykonać obliczenia według poniższych wzorów a wyniki wpisać do tabeli,

WiIgotnośćgleby[%] - ^sagleby wilgotnej-masa^bysuchej ^

masa gleby suchej

Liczba bakterii, promieniowców lub grzybów w 1 gramie świeżej masy gleby (a):

średnia liczba kolonii na szalce

a *-

rozcieńczenie

Liczba bakterii, promieniowców lub grzybów w 1 gramie suchej masy gleby (b):

_i a (100 » wi Ig otność gleby w %)

100

Wyniki wpisać do tabeli:

Numer gleby	Grupa mikroorganizmów	Rozcieńczenie	Średnia liczba kolonii	Liczebność w 1 g gleby
				świeżej	suchej
	Bakterie	40 ^		300000
	Promieniowce	40"*	5	5W fOOO
	Grzyby	iO'^0>	ub5	ti'6 OOO

Data Zaliczono