3582468886

Temat: Chromatografia cienkowarstwowa (TLC)

Cel ćwiczenia: Zapoznanie się z podstawami wykonywania analizy jakościowej związków organicznych z wykorzystaniem metod chromatograficznych, a w szczególności chromatografii cienkowarstwowej (TLC)

Materiały i metodyka:

Faza ruchoma - toluen: mrówczan etylu: kwas mrówkowy (5:4:1)

Badana próba (C) (mieszanina substancji) oraz ekstrakt z mniszka w metanolu i ten sam ekstrakt w wodzie.

Wzorce:

1.    Kwas anyżowy,

2.    Kwas cynamonowy,

3.    Kwas feruIowy,

4.    Kwas galusowy,

5.    Kwas gentyzynowy,

6.    Kwas kawowy,

7.    Kwas p-kumarowy,

8.    Kwas syrygnowy,

9.    Kwas waniliowy.

Sprzęt i aparatura badawcza:

•    Komora chromatograficzna,

•    Płytki chromatograficzne,

•    Lampa UV.

Wykonanie ćwiczenia:

Wskaźniki, badaną próbę oraz ekstrakty z mniszka nanosimy na płytkę, na linie startu w postaci plamek okrągłych. Linia startu powinna być umieszczona w odległości 1,5-2,0 cm od brzegu prostokątnej płytki, aby po umieszczeniu jej w komorze, linia startu nie była zanurzona w eluencie Miejsca naniesienia próbek można zaznaczyć delikatnie ołówkiem. Rozwijanie chromatogramu przeprowadzamy w komorze chromatograficznej. Do komory wlewamy rozpuszczalnik do wysokości ok. 0.5 cm, zwracając uwagę aby poziom rozpuszczalnika znajdował się poniżej linii startowej na płytce. Wewnątrz komory ustawiamy się bibułę, która nasiąkając rozpuszczalnikiem utrzymuje nasycenie komory jego parami. Płytkę wstawiamy do komory linią startową do dołu i zakrywamy szczelnie pokrywą. Gdy rozpuszczalnik osiągnie wysokość ok. 1 cm od górnej krawędzi płytki, wyjmujemy ją z komory i pozostawiamy do wyschnięcia. Ołówkiem zaznaczamy linię, do której dotarł rozpuszczalnik („czoło rozpuszczalnika").