24672

6.1.2. Typy reakcji histochemicznych

Wykrywanie określonych substancji lub grup chemicznych w komórkach i tkankach opiera się na kilku zasadniczych typach reakcji histochemicznych:

^bezpośrednia reakcja wykrywanej substancji lub grupy z substratem, prowadząca do powstania produktu wyznaczającego miejsce jej lokalizacji (np. reakcja z dwunitrobenzenem wykrywająca reszty tyrozynowe białek);

^reakcja dwu- lub kilkuetapowa, w której w'stępnie dochodzi do zmiany struktury chemicznej wykrywanej substancji, a następnie ten zmieniony związek chemiczny wykrywany jest przez przeprowadzenie końcow ej reakcji barwnej (np. tworzenie grup aldehydowych w wielocukrach pod wpływem utlenienia i ich następowe uwidocznienie odczynnikiem Schiffa w reakcji P.A.S.); $ specyficzne wiązanie niektórych barwników na drodze oddziaływań elektrostatycznych (np. wykrywanie kwaśnych, anionowych glikozoaminoglikanów kationowym błękitem alcjanowym); ?? stereospecyficzne wiązanie niektórych baiwników przez określone związki wysokocząsteczkowe (np. wykrywanie DNA zielenią metylową);

?5 wybiórcze uwidacznianie niektórych związków chemicznych oparte na selektywnej rozpuszczalności w nich barwników (np wykrywanie lipidów Sudanem 111)

Niekiedy złożone procedury' histochemiczne mogą być kombinacją kilku powyższych typów reakcji Odr ębnym działem histochemii są reakcje enzymatyczne (p. dalej).

6.2. Przygotowanie materiału do badań histochemicznych

Wybór metodyki przygotowania materiału biologicznego do reakcji histochemicznej podporządkow any jest charakterowi wykrywanej substancji oraz wymaganiom i specyficzności reakcji Niekiedy nawet dobr e zachowanie struktury' materiału musi zejść na drugi plan wobec