37274

TABELA. Współczynniki przeliczeniowe azotu na białko oraz ilość odczynników stosowanych

podczas mineralizacji niektórych		produktów żywnościowych.
prodtdcl	Masa naw.iAi	Ot»j H2S04	M Kataliza!	Współczynnik przeliczeniowy

Destylacja amoniaku z parą wodni)

NH₃+ HiBO, —> NHtH₂BOj

W odbieralniku wydzielony amoniak wiąże się ze słabym kwasem, np. kwasem borowym występującym w nadmiarze.

Miareczkowanie.

NH₄H₂BOj + HC1 -> NH4CI + H₃BO,

LUB

2 NH4H2BO3 + H₂S0₄ -» (NH₄)₂S0₄ + 2 HjBCb

Ilość azotu w próbce obserwuje się w ilości ml kwasu zużytego do miareczkowania.

1 cm* H₂S0₄(o stężeniu 0,1 mol/dm^J)= 0,0028g N 1 cm³ HC1    (-H-)    = 0,0014gN

Met. Kjeldahla- automatyczne urządzenia służące do oznaczeń.

METODY OPARTE NA WBUDOWANIU BARWNIKA.

>    Czerń amidowa 1 OB

>    Oranż G

>    Błękit Coomassie G-250

Rys. 12. Czerń amidowa 10R.

Białko 1 barwnik reagują ilościowo tworząc nierozpuszczalne kompleksy.

-    oddzielenie kompleksu przez wirowanie lub sączenie.

-    natężenie barwy uzyskanego roztwom zależy od ilości barwnika niezwiązanego z białkiem (barwnik dodawany w nadmiarze), czyli jest odwrotnie proporcjonalny do ilości białka w próbce.

MIARECZKOWANIE FORMOLOWE

Polega na zobojętnianiu kwaśnych soli znajdujących się w badanym białku roztworem NaOH, zablokowaniu formaliną niezwiązanych grup aminowych i odmiareczkowaniu wolnych grup karboksylowych występujących w białku ( kwas asparaginowy i glutaminowy) roztworem wodorotlenku sodu.

NH? |		N=CH?
R-CH +	HCHO *	R-CH +
COOH		| COOH