110400

Ugandy oddziałujące z białkami. Ważne jest, aby chelatowanie jonów metali było na tyle silne, żeby nie następowało ich wymywanie podczas procesu oczyszczania. Wyróżniamy trzy złoża opracowane dla układu IMAĆ:

• IDA-agaroza (ang. Iminodiacetate) - złoże agarozowe posiadające jako grupy aktywne reszty kwasu iminodioctowego. Grupa ta stosunkowo słabo chelatuje jony metali, ponieważ posiada tylko trzy Ugandy zdolne do kompleksowania. Chelatowany jon metalu w geometrii oktaediycznej posiada aż trzy wolne miejsca koordynacyjne, które potencjalnie mogą służyć do wiązania oczyszczonego biała (tys. 2). IDA jest grupą wywierającą niewielki efekt steryczny na pozostałe wolne miejsca koordynacyjne jonu metalu - w efekcie obniża to selektywność wiązania oczyszczanych białek.

Rys.2. Schemat złoża IDA.

X - wolne miejsca koordynacyjne jonu metalu zdolne do kompleksowania z resztami białka;

Me - chelatowany przez złoże jon metalu, np. Ni²'.

• TED-agaroza (ang. tris(carboxymethyl)ethylenediamine) - złoże agarozowe posiadające jako grupę chelatującą jony metali tris(karboksymetylo)etylenodiaminę. Grupa ta posiada pięć miejsc ligandowych zdolnych do chelatowania jonu metalu. Powoduje to, że złoże TED silnie wiąże jony metali i w efekcie nie następuje wypływ jonów podczas oczyszczania. Chelatowany przez TED jon metalu w układzie oktaedrycznym posiada wolne tylko jedno miejsce koordynacyjne (iys.3). Wynikiem tego jest mniejsza pojemność złoża TED niż złoża IDA. TED jest złożoną grupą przestrzenną wywierającą silny efekt steryczny na wiązanie białka przez jon metalu - złoże TED jest znacznie bardziej selektywne od złoża IDA.

2