BORELIA, STREPTOCOCCUS, ENTEROCOCCUS, ARCANOBACTERIUM, CORINOBACTERIUM, RHONOBACTERIUM
Mikrobiologia 28.11.2011
Borelia
Czynniki wirulencji
Lipopolid sacharyd ściany o własciwościach toksycznych oraz peptydoglikan o wlaściwościach prozapalnych -> aktywuje makrofagi które prod IL1 a ta stymuluje limf T co jest ważne w 2 stadium choroby.
Wektor(kleszcz przenosi i nimfy); Erythema nigranis - rumień wędrujący; obiajwy grypopodobne - gorączka bóle mięśniowe. Ten onkres trwa do 30 dni i objawy znikają.ale po kilku tygodniach czy miesiacach zaczynają się objawy nietypowe, bo borelia wedruje z krwią atakujac cun, stawy i serce, zapalenie nerwów twarzowych, reumatoidalne zapalenie stawów (kolano, łokciowy, ramieniowy i bolesność stawów może się przenosic), stany zapalne mieśnia sercowego.
3 stadium - zaniki chrzastki i zanikowe zapalenie skóry
Borelia usadawia się w tkankach jeżeli jest w krwi można ją antybiotykami zabić, natomiast gdy jest w tkance to nie da się wykurzyc
Diagnostyka
Krew plyn stawowy, mozgowo rdzeniowy,
Ogladamy w ciemnym polu albo barwimy giemzą i pod mikroskop, skrawki cienkie i badanie na przeciwciałach; [choroba z Lyme- ludzie zapadali tam na dziwną chorobe objawiajaca się tylko zanikiem chrząstki]
BSK - Kelly, krwe końska , albumina bydleca, antybiotyki neomycyna i amfoterycyna, przez 6 tyg hodujemy i co tydzień sprawdzamy czy rośni; 28-33 stopnie, warunki mikrofilne z dodatkiem CO2,
ELISA
Western-blot
Po 3 tyg pojawiaja się IgM a poźniej IgG i świadczy to o tym ze jest to proces uśpiony, stosunek ilość igM do IgG wskazuje na stadium choroby
Jest szczepionka na bazie białka powierzch A w ameryce, ale u nas może być nieuzyteczna
Paciorkowce
Firmuctus
Klasa : Bacilli
Rząd: Laitobacillaes
Rodzina: Streptococcaceae
Rodzaj: Streptococcus
Enterococcus
Pierwszy podział to podział ze wzg na zdolności hemolityczne paciorkowców:
Beta - najbardziej zjadliwe, alfa, gamma - brak hemolizy
2 podział - podział Shermana biorąc pod uwage objawy choroby:
-ropne albo ropotworcze izolowane z ropy
-mlekowe przy stanach zapalnych gr mlekowego
-kałowe przy st zapal jelit
-zieleniejące z jamy ustnej
3. podział - Lancefield - wł antygenowe, podzial serologiczne, dokladnie dotyczylo to węglowodanu C w ścianie kom:
hodujemy je na bulionie (wyizolowane ze zmian chorobowych), odwirowujemy, wyestrahowujemy HCl i zabijamy w łaźni wodnej lub autoklaw przez 15 min, neutralizujemy do pH obojętnego, jeszcze raz wirujemy i supernatant to antygen.
Surowice mamy gotowe na królikach.
Mianuje się to w teście precipitacji węglanowej; na górze antygen na dole surowica na styku pierścień precypitacyjny.
Gr. A - sterptococcus pyogenes
Gr. B - S. agalactiae
Gr C - S. equi - susp equi i susp zooepidermii; S. dysgalactiae susp dysgalactiae i susp equisimilis - te podkreślone atakują konie
Gr. D - enterococus - E.faecalis, E.faecium, E.durans; w tej gr jest S.suis jest jeszcze gr RST
Gr. E - S. porcinus, ktory jednocześnie należa do PUV
Gr. G - S. canis - u psów i kotów odpowiedzialne za stany ropne
Poza klasyfikacja bardzo ważne są S. uberis i S. pneumonae
Najnowszy podział filogenetyczny - 16srRNA
I paciorkowce ropne (A+B+C+G) - hemoliza beta
II gr mitis (s. mitis, S. sangquinis, S. oralis, S.pneumonae)- alfa albo beta
TE PONIŻEJ SĄ W NADGRUPIE VIRIDANS (ORALIS)
III anginosis (milleri) - S.anginosus, S.intermedius - HEMOLIZA ALFA
IV mutans - S.mutans, S.ratti, S.sobrinus - HEM ALFA
V salicarius- S.salivarius, S. thermophilus - BRAK HEMOLIZY
VI bovis - ma 3 biotypy -1, 2 ,3, S.equinus - BRAK HEMOLIZY
MORFOLOGIA
Ziarniaki G+ tworza łańcuszki różnej długości i poniżej 1 mikrometra (gronkowce powyżej), te zjadliwe posiadają otoczki-> peogenes - kw hialuronowy(operon has, a,b,c), to podj kw glukoloronowego, i N-acetyloglukozaminy; agalacrtiae - kw schialowy, glukoza, galaktoza, glukozamina; pneumonie - otoczka polisacharydowa wielocukrowa; bakt sa tlenowcami , ale są wzg beztlenowcami (5%CO2 poprawia wzrost), katalazo i oksydazo negatywne, bez rzęsek i przetrwalników
Czynniki wirulencji
Białko M o wł cytotoksycznych, antyfagocytarnych i antykomplementarnych; ma charakter antygenowy. Jest 148 genow każdy koduje inny rodzaj białka M - jeżeli mamy angine to wyleczenie nie powoduje wyleczenia z innego [pani się załamała bo ostatnio jak czytała to było 80]
Otoczka - antyfagocytarne
Białko F - o wlaś adhezyjnych
Białko G - o właś antyfagocytarnych
Egzotoksyny
SPE/Spe - A,B,C
Wywołuje szkarlatynę u dzieci i te toksyny wywołują wybroczyny (cytolityczne właściwości). Normalna kom ma tylko jeden gen który koduje toksyne B, ale jest taki fag który koduje A i C i jeżeli zaatakuje kom baktreryjna to wczepia te geny to zaczyna je produkować. Jeżeli ma toksyne A, białko M1, proteinaza - szok toksyczny. toksyny te sa superantygenami, a najwieksze takie wlas ma toksyna A, które pobudzaja limf T do odczynu zapalnego.
Są jeszcze białka hemolizyny O i S. S nie ma charateru antygenowego, wytw hemolizę beta. Bardzo niebezpieczna jest hemolizynaO - indukuje odpowiedz humoralna i powstaja przeciwciała anty O (ASO-antystreptolizy O), miano 200 i powyżej swiadczy o tym ze styknelismy się z paciorkowcem który wytw hemolizyne O. Przeciwciała wykazuja powinowactwo do miozyny mieśniowych włókien i mięśni szkieletowych i sercowych i bardzo często są przy infekcji dlugotrwalej one atakuja miesień sercowy - może dojsc do bloku i łącza się z bakteriami i atakują stawy.
Hemolizyna O wiaze cholesterol scian kom i stają się one hydrofilne (cytolityczne właściwości.
Czynniki rozprzestrzeniania się:
hialuronidaza
proteinazy
streptokinaza/ fibrynolizyna - rozwala skrzep prrzy stanie zapalnym i może się rozprzestrzeniac
nukleazy / streptodonazy - dizałąja na kwas nukleinowy
faktor CAMP (S.agalactiae) - białko CFB, cytolityczne które uszkadza krwinki.
Pneumonie - pneumolizynę, która powoduje nekroze pecherzykow płucnych i neuronimidazę , która obniza gestość śluzu i ujawnia receptory.
Patogeneza
Stany ropne atakuja wszystkie uklady i narzady, te z białkiem M ciezkie do wyniszczenia
Diagnostyka
Wysięk, ropa, mleko(odwirować), zeskrobiny ze zmian skórnych, płyn mózgowo-rdzeniowy, zmienione tkanki. Przy transporcie próbek nie może dojsc do wysuszenia bo na to sa wrazliwe.
Bad bezpośrednie mikroskopowe - barwienie Grama, pod mikroskopem - granatowe łańcuszki, zwłaszcza z ropy; pneumoniae często wystepuje parami
Bad hodowlane - podłoża wzbogacone najlepiej z krwią, wybiórczo-różnicujące Edwardsa, McConkeya; inkubacja w 38stop, 24-48 h, kolonie sa male szare, ok. 1 mm średnicy, okrągle , błyszczące; susp equi - mukolidalne kolonie (tak samo pneumoniae);
Gram dodatnie - krótsze
Na katalaze negatywny - odróznia od gronkowców!!!!!
Grupujemy w precypitacji
Rtesty biochemiczne - apitesty - przy izolacji końskich paciorkowców, rząd cukrowy krótki - wszystkie rozkladaja maltozę, zooepidem - laktozę, equisimilis - trehalozę;
Mastitis - agalactiae - w tescie CAMPa daje +, uberis - +eskulinę, dysgalactie
Testy
CAMPa - agalactiar
Hydroliza hippuranu sodu - gr B+
Wytw karotenoidu w warunkach beztl - gr B+
Wrażliwość na bacytracynę - gr A+
Wrażliwość na optochinę - pneumoniae
Wraż na żółć - pneumoniae
Reakcja z Amylazą - suis na podłożu ze skrobią, nie wytw acetoiny w szybkim teście
Enterokoki:
Paciorkowce rosnal w 45 stop , 6,5%stez soli, ph 9,6 silnie zasadowy roztwór, 40% żółć, rosnął na Mc Conkeyu jako jedyne!!
Typ I klasaActinobacteria
Rząd - Actinomycetales nocardiaceae
Rodzine - Actinomycetaceae rhodococcus - r. aqui
Arcanobacterium
Gatunki - arcanobacterium haemoliticum i A.peogenes
Corynebacteriaceae
Corynebacterium
C. diphthriae (błonice wywołują)
C. pseudotuberculosis -przerzuwacze, wywołuje serowaciejace zapalenie wezłów chł i naczyń
C. renale, pilosum, cystitidis - przerzuwacze
Arcanobacteriae - atakuje fermy świńskie!!, pałeczki gram +, kokopałeczki do 1,5um dł, bez rzęsek otoczek i przetrwalników; katalazoujemne, wymagają bogatych podłóż, dobrze rosnął na krwi a jeszcze lepiej na Columbii (krew +glukoza), war mikroerofilne?, tlenowce;
Czynniki wirulencji
Piolizyna - cytotoksyna, o właściw hemolitycznych, dermonekrotoksycznych i letalnych, posiada ok. 40% aminokw wspolnych z cholesterolem (podobnie do steptolizynyO), zastepuje tluszcze w ścianie i zmienia ja na hydrofilna, moduluje odp immunologiczna przez stymulację limf T do produkcji cytokin prozapalnych.
Białka adhezyjne -
Enzym DNA-aza - dna neutrofili uszkadza
Neuraminidaza - ułatwia przyczepność bakterii
Proteazy - kazeinaza i żelatynaza, które rozkładają SIgA
Diagnostyka
Wysieki zmienione tk, mleko jeśli mastitis, w
Barwimy gramem (+), siejemy na podloza bogate, 37stop, dluzej się inkubuje ok. 3 dni, drobne kolonie z hemolizą beta.
Autoszczepionki bardzo pomagają.
Corinobaterium - maczugowce
Gram + pałeczki do 5 um długości, roszerzone na jednym biegunie , stad nazwa maczugowce, biegunowo posiadają ziarnistości Ernsta Babesa, które sa skupiskami forsforanu wysokoenergetycznego, nie wytw rzęsek , przetw i otoczek , ale charakterystycznie zbudowana ściana z kw mezodiaminopimelinowego + kw mykolowy w krótkich łańcuchach; cukry arabinoza, galaktoza; kw tłuszczowe - palmitynowy, olejowy, stearynowy, i tuberkulostearynowy(w mykobakterii). Gr renale posiada fimbrie, które ułatwiaja adhezje do śluzówki dróg moczowych
Czynniki wirulencji
Difterie - po zakarzeniu fagiem beta, wytwarza egzotoksyny (konwersja lizogenna!!)
Fosfolipazy - hydrolizuja sfingomielinę wchodzaca w sklad ściany i lipidy
Diagnostyka
Do badania - ropa, mocz(gr renale), zmienione tk(tuberculosis), naczynia limf
Bezpośredni - gram +
Na agar z krwia siejemy, 37stopni, aerofilne w pierwszych pasazach, hodujemy 2-3 dni, charakt kolonie, pseudotuberkulosis przypominaja kolonie prątków, drobne suche, matowe, białe, z warstwa hemolizy beta, ; renale - metne, cystitidis - przejrzyste;
Renale nie rozkłada maltozy , pseudotuberkulosis
Rhodococcus
Gram+ posiadaja otoczke polisacharydową, dzieki kw mykolowymw ścianie wybarwiaja się zmodyfikowaną metodą Ziehl- neelsena, katalazododatnie, na agarze odzywczym z dodatkiem krwi i tyminy??, tlenowe, mikroaerofilne,
Czynniki wirulecji
Namnazaja się w makrofagach nie dopuszczajac do fuzji fagosomu z lizosomem. W plazmidach są geny które kodują syntezę białek VapA i B (białka pow o charakterze adhezji),
Otoczka, kw mykolowe, factor equi- dwa enzymy fosfolipaza C i oksydaza cholesterolowa, które działają cytolitycznie.
Rhodococcus - brochopneumonie wywołuje szczególnie u młodych zwierząt, zaraz z kałem i długo przebywa w glebie.
Wymazy z gr drog oddechowych, pod mikroskopem drobne paleczki gram +, na podłozach wzbogaconych 2-3 dni, drobne kolonie a po 4-5 dniach zrobia się mukoidalne i zabawia się na łososiowy kolor, beta hemoliza