55233

2. Spektrofotometryczne oznaczanie zaw artości chlorofilu

Materiał: alkoholowy wyciąg barwników Sprzęt: spektrofotometr Odczynniki: metanol Wykonanie:

W otrzymanych ekstraktach oznaczyć spektrofotometrycznie stężenie chlorofilu a i b. W tym celu dokonać pomiaru absorbancji (A) ekstraktów przy długościach fali 750, 665, 649 nm, wobec metanolu jako odnośnika.

L.p.	Absorbancja			chi a Ulg cm’^3]	chi b [pg cm'^3]	chi a/chl b
	A«s	Afc-w	A?50
1

Obliczyć stężenie chlorofilu a i b w badanych ekstraktach, podstawiając otrzymane wartości absorbancji do poniższych wzorów. Wartość Atso traktować jako poprawkę na zmętnienie.

chi a = 13,95 A<*;- 6,88 Au^lpgcm³]

chi b = 24,96 At»- 7,32 A**.-, [pg cm'³J

Wyznaczyć średnie ilości chlorofilu a i b w 10 cm³ badanej zawiesiny glonów. Wyznaczyć stosunek molowy clii a/chl b (masy cząsteczkowe: clii a 849 Da, clii b 908 Da).

Zinterpretować otrzymane wyniki.

3. Rozpuszczalność lipidów

Do probówek zawierających po 2ml rozpuszczalników organicznych (metanol, etanol, butanol, aceton) i probówki z wodą dodać kilka kropli oleju. Zaobserwować różnice w rozpuszczalności tłuszczu w poszczególnych rozpuszczalnikach, wyciągnąć wnioski.

4.    Właściw ości redukujące cukrów - reakcja Benedicta

Przygotować po lOOml 1% roztworów cukrów (laktoza, skrobia i glukoza).

Do 2 ml odczynnika Benedicta dodać 4 krople: roztworu glukozy (a), roztworu skrobi (b), roztworu laktozy (c); ogrzać do wrzenia, zaobserwować różnice i wyciągnąć wnioski.

5.    Przygotow anie podłoża LB (Luria-Bertani Broth, Sambrook i in., 1989, AppendixA.l)

skład na 1000 ml pożywki

Pepton    10 g

Ekstrakt drożdżowy    5 g

NaCl    10 g

woda destylowana    1000 ml