84761

nosi nazwę (site directed mutagenesis) mutageneza ukierunkowana. Opisowo możemy powiedzieć ze wprowadzamy mutacje tam gdzie chcemy czyli tak jak to jest na naszej ilustracji:

W sekwencji kodującej zamieniamy wybraną resztę i wprowadzamy te zmianę kodonu, istotą techniki mutagenezy czy też eksperymentu, w którym wykorzystuje się mutagenezę ukierunkowaną jest po pierwsze wprowadzenie mutacji a po drugie obserwowanie zmiany jaką ta mutacja wprowadza. Tak jak poprzednio mówiłem to jest możliwe tylko wtedy jeżeli mamy określony jakiś układ odniesienia, jeżeli możemy porównać do czegoś właściwości tak zmienionego produktu. Zatem w eksperymencie mutagenezy po pierwsze wprowadzamy mutację, zamienimy sekwencje kodującą w jakimś tam zakresie, to wprowadza mutację w białku, na przykładzie izoleucyna została zamieniona na leucynę i otrzymujemy produkt białkowy o określonych właściwościach. Ale te właściwości są dla nas istotne tylko wtedy gdy porównamy je z właściwościami białka typu dzikiego. Także każdy eksperyment mutagenezy polega na, że mamy produkt zmieniony i produkt typu dzikiego i je porównujemy ze sobą. Tak jak tutaj porównano czy też zilustrowano, te typ dzikiego służą do wytworzenia białka typu dzikiego określonych właściwościach i te właściwości są ze sobą zestawiane i porównywane

Teraz chciałem omówić pobieżnie kilka technik mutagenezy (tutaj wywód że jest to temat rzeka można by cały semestr wykładać)

Ja po prostu zwrócę uwagę na pewne problemy i metody. Różne są metody wprowadzania mutacji, na przykładzie który przed chwilą państwu pokazywałem na ilustracji była prosta mutacja, mutacja punktowa czyli zamiana jednej reszty aminokwasowej na druga, ale mutacje ukierunkowane to nie tylko zamiany reszt. Mutacje ukierunkowane czyli kierowane przez badacza mogą prowadzić do delecji fragmentu sekwencji w jakimś białku, do inercji to też mutacja czyli wbudowujemy w białko sekwencje której tam wcześniej nie było. Może to być również tecluuka w której jakiś fragment w białku podstaw^imy fragmentem innego białka to jest też mutacja, także proszę nie myśleć ze mutacji ukireunkowanej jako tylko o zamianie jednej reszty. Chodzi o to, że każda z tych metod jest racjonalna, eksperymentator do końca panuje na tym i wie czego chce. A jeżeli nie panuje to jest to z zamysłem. Wiec pierwszym przykładem jest mutacja, tecluuka w której zmierzamy do delecji fragmentu genu. Mamy sytuacje wyjściową czyli układ odniesienia.