3784498075

XIX OAK Referaty

Białko Aha1 i jego wpływ na aktywność ATPazową Hsp90

Paweł Krawczyk¹'², Jakub Urbański²

E-mail: Paweł Krawczyk <[e-mail]>

¹ K MISMaP UW ² Zakład Biologii Molekularnej Międzynarodowego Instytutu Biologii Molekularnej i Komórkowej w Warszawie (IIMCB)

Słowa kluczowe: chaperon, białka opiekuńcze, nowotwory, białka szoku cieplnego, Hsp90, Ahał, ATPaza

Rodzaj: 12min

Ahal (ang. Activator of Hsp90 ATPase - aktywator ATPazy Hsp90) jest kochaperonem ATP-zależnego białka chaperonowego Hsp90, zaangażowanego w dojrzewanie, stabilizację/degradację i funkcjonowanie wielu białek związanych z nowotworami. Dostępne dane pokazują, że Ahal pełni ważną rolę w regulacji aktywności ATPazowej Hsp90, która to aktywność jest niezbędna dla jego funkcjonowania in vivo. Ahal jest jednym z czynników zmieniających czułość Hsp90 na leki przeciwnowotworowe takie jak 17-AAG (17-alliloamino-17-demetoksygeldanamycyna), wiążąca się z domeną wiążącą ATP w Hsp90. W mojej prezentacji chciałbym pokazać część wyników z badań mojego zespołu. Nasze badania są zwrócone szczególnie na analizę funkcji Ahal w testach na aktywność ATPazową Hsp90 in vitro. Potwierdziliśmy wcześniej publikowane wyniki pokazujące wzrost aktywności ATPazowej Hsp90 pod wpływem Ahal, sprawdziliśmy także oddziaływania białka Ahal z mutantami Hsp90 wykazującymi zaburzenia w wiązaniu ATP. Nasza badania in vivo zwrócone są głównie na porównanie poziomów ekspresji Ahal w różnych liniach komórkowych, zarówno nowotworowych jak i nienowotworowych. Pokazaliśmy, co jest zgodne z wcześniejszymi publikacjami, że poziom Ahal w różnych liniach komórkowych znacznie się zmienia, wykazując podwyższony poziom w liniach nowotworowych. Inne podejście do badań zakłada wykorzystanie techniki siRNA w celu sprawdzenia funkcjonowania Ahal w aktywacji różnych białek-klientów Hsp90. Wszystkie uzyskane wyniki są zgodne z publikowanymi do tej pory, stanowią także kolejny krok na drodze ku zrozumieniu mechanizmu działania skomplikowanego kompleksu białek opiekuńczych w komórkach nowotworowych oraz zdrowych.

AHa1 protein and its influence on the ATPase activity of the Hsp90 chaperone protein

Keywords: chaperone, cancer, heat shock proteins Hsp90, Ahal, ATPase

Ahal (activator of Hsp90 ATPase) is a cochaperone of the ATP-dependent molecular chaperone Hsp90, which is involved in maturation, stabilization/degradation and function of many oncogenic proteins. Recent data show that Ahal plays an important role in regulating the ATPase activity of Hsp90 which is crucial for its function in vivo. Ahal is also one of the factors changing Hsp90 sensitivity to cancer drugs like 17-AAG (17-allyloamino-17-demethoxygeldanamycin), which binds the ATP-binding domain of Hsp90. In my presentation I would like to show some results of my group research. Our work is aimed at investigating the in vitro function of Ahal in Hsp90-ATPase-activity assays. We confirmed previous results showing that Ahal increases the ATPase activity of Hsp90 in vitro and in another part of our work we investigated interactions of Ahal with different Hsp90 ATP-binding mutants. Our in vivo work is aimed at comparison of Ahal levels in different celi lines - oncogenic and non-oncogenic. We showed, what is consistent with another published data, that Ahal levels vary significantly in different celi lines, showing higher levels in oncogenic lines. In another approach we use the siRNA targeting Ahal to check the function of Ahal in activation of different Hsp90 client proteins in vivo. Ali presented results are consistent with another published data and are another step in finding the exact mechanism of function of multichaperone complex in oncogenic and normal cells.

20